[发明专利]一种DEFA4用于诊断肝衰竭的新用途及试剂盒及试剂盒用于诊断肝衰竭的应用

说明书

本发明公开了是一种DEFA4用于诊断肝衰竭的新用途及试剂盒及试剂盒用于诊断肝衰竭的应用，本发明所述样本来自于肝衰竭患者或肝衰竭高危人群，所述体液样本优选为血液样本，所述血液样本为血清样本或血浆样本；所述的细胞样本为外周血单个核细胞样本；组织样本为肝组织样本，本发明的DEFA4 mRNA诊断试剂盒方法简便，检测过程简单、易于重复，具备专业资格的技术人员均可以完成，可行性强，DEFA4 mRNA诊断试剂盒能够提供准确的预测结果，及时反映肝衰竭患者的疾病状态，可早期诊断肝衰竭，并指导医生对其进行早期治疗，降低病死率。

技术领域

本发明涉及临床医学、生物医学和医学检验技术领域，具体地说，是一种检测DEFA4分子用于诊断肝衰竭的新用途及试剂盒及试剂盒用于诊断肝衰竭的应用。

背景技术

肝功能衰竭是一类各种原因引起的肝脏大面积坏死所致的疾病，病情凶险，患者多于短期内死亡，常规内科综合治疗病死率高达50％-90％。除原位肝移植外，目前尚缺乏特异性治疗方法。但由于严重的供肝短缺，大量患者在等待肝移植的过程中死去。目前临床用于诊断肝衰竭的方法是基于生化指标中的总胆红素传统的凝血指标，如凝血国际标准化比例、凝血酶原活动度等。出现这些指标的显著异常，通常患者已出现明显肝细胞坏死，全身细胞因子风暴，肝脏代谢、解毒功能显著降低，进入病情迅速进展阶段，难以控制，对治疗造成了很大的困难。因此，对肝衰竭进行早期诊断，对实现早期治疗，降低病死率具有极其重要的意义。

随着生物技术和分子医学的发展，基于基因或蛋白分子检测的肿瘤诊断方法和试剂等在临床上目前已得到了应用，对提高患者的诊断和治疗效果，发挥了重要作用。在人类基因组序列中，只有不到2％是编码序列，mRNA为编码序列转录后形成的具有编码蛋白质功能的RNA，mRNA在生命的进程、疾病的发生发展中都发挥了重要作用，其异常表达则会造成各类疾病的发生。相比DNA突变等检测手段，mRNA具有更好的生物学功能。

本课题组研究发现DEFA4参与肝衰竭发生、发展中的众多环节，与肝衰竭过程中的核心功能，如免疫、凋亡和代谢等多个生物学途径密切相关，因此，DEFA4 可以作为一种早期诊断肝衰竭的指标，具有潜在的应用价值。

发明内容

本发明的第一目的是针对现有技术的不足，提供一种DEFA4分子的检测在诊断肝衰竭疾病中的应用，第二目的是提供一种用于检测DEFA4 mRNA的诊断试剂盒。

为实现上述第一目的，本发明通过高通量mRNA测序结合生物信息学方法筛选到基因DEFA4，进而通过荧光定量PCR方法验证了DEFA4分子与肝衰竭具有很好的相关性，可用于诊断肝衰竭，具有重要的临床应用价值。

进一步，检测样本为细胞、组织样本和体液样本。所述样本包括并不局限于血清样本、血浆样本和外周血单个核细胞样本。

为实现上述第二目的，本发明采取的技术方案是：一种用于诊断肝衰竭的试剂盒，所述试剂盒包含DEFA4的检测试剂。

本发明的具体技术方案如下：

一种DEFA4分子作为肝衰竭样本在诊断肝衰竭中的新用途。

作为进一步地改进，本发明所述样本来自于肝衰竭患者或肝衰竭高危人群。

作为进一步地改进，本发明所述样本为细胞样本、组织样本或体液样本。

作为进一步地改进，本发明所述体液样本优选为血液样本，所述血液样本为血清样本或血浆样本；所述的细胞样本为外周血单个核细胞样本；组织样本为肝组织样本。

本发明还公开了一种用于诊断肝衰竭的试剂盒，所述试剂盒包含DEFA4的检测试剂。

作为进一步地改进，本发明所述检测试剂包含：

a)DEFA4扩增引物对；和/或

b)PCR扩增所需试剂；和/或