[发明专利]一种用于修复毛囊的育发液制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于修复毛囊的育发液制剂，其特征在于，所述育发液制剂由占芭花提取液、干细胞提取物溶液、防腐剂、肌醇、黄原胶、去离子水和pH调节剂制成；

所述占芭花提取液为占芭花的60％～65％的乙醇溶液的回流提取液；

所述干细胞提取物溶液为间充质干细胞破碎细胞液或者间充质干细胞培养液在13000×g下离心收集到的上清液经100000×g离心得到的外泌体沉淀的溶液；

所述pH调节剂用于将育发液制剂调节pH为6；

所述育发液制剂中占芭花提取液、干细胞提取物溶液、去离子水、肌醇、黄原胶的用量比例为：1～3ml:6-8ml:0.6-1.6ml:0.15-0.3g:0.01-0.05g；

所述育发液制剂在制备用于雄激素源性脱发的制剂中应用；

所述育发液制剂通过以下方法制备：

(1)将占芭花鲜花在18倍占芭花鲜花重量的65％乙醇中回流提取1.5h，过滤得到滤渣A和滤液A；将滤渣A在10倍占芭花鲜花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，过滤得到滤渣B和滤液B；将滤渣B在8倍占芭花鲜花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，过滤得到滤渣C和滤液C；将滤液A、滤液B和滤液C混合均匀后浓缩至占芭花鲜花5倍重量，得占芭花提取液；

(2)间充质干细胞体外培养后，固液分离得到间充质干细胞和间充质干细胞培养液；将间充质干细胞分散在生理盐水中，得到细胞密度1×10⁶个/ml，经600W超声10min细胞破碎后得到间充质干细胞破碎细胞液，将间充质干细胞破碎细胞液在300×g离心10min后收集上清液A，将上清液A在2500×g离心30min后收集上清液B，将上清液B在13000×g离心1h后收集上清液C，将上清液C在100000×g离心70min得到外泌体沉淀A；将间充质干细胞培养液在2000×g离心10min后收集上清液D，将上清液D在13000×g离心1h后收集上清液E，将上清液E在100000×g离心70min后得到外泌体沉淀B；将外泌体沉淀A和外泌体沉淀B溶解于生理盐水中得到干细胞提取物溶液；

(3)将步骤(1)得到的占芭花提取液、步骤(2)得到的干细胞提取物溶液、防腐剂、肌醇、黄原胶、去离子水按照比例混合均匀；

(4)用pH调节剂调节pH值至育发液制剂的pH为6。

2.根据权利要求1所述的用于修复毛囊的育发液制剂，其特征在于，所述干细胞提取物溶液的制备方法包括以下步骤：

(1)间充质干细胞体外培养后，固液分离得到间充质干细胞和间充质干细胞培养液；

(2)将间充质干细胞分散在氯化钠溶液中，经超声细胞破碎后得到间充质干细胞破碎细胞液，将间充质干细胞破碎细胞液在300×g离心后收集上清液A，将上清液A在2500×g离心后收集上清液B，将上清液B在13000×g离心后收集上清液C，将上清液C在100000×g离心得到外泌体沉淀A；

(3)将间充质干细胞培养液在2000×g离心后收集上清液D，将上清液D在13000×g离心后收集上清液E，将上清液E在100000×g离心后得到外泌体沉淀B；

(4)将外泌体沉淀A和外泌体沉淀B溶解于氯化钠溶液中得到干细胞提取物溶液。

3.根据权利要求2所述的用于修复毛囊的育发液制剂，其特征在于，所述干细胞提取物溶液中BCA蛋白浓度为30mg/ml，所述间充质干细胞为人脐带间充质干细胞，步骤(2)和步骤(4)中的氯化钠溶液为生理盐水。

4.根据权利要求1所述的用于修复毛囊的育发液制剂，其特征在于，所述占芭花提取液的制备方法包括以下步骤：

(1)将占芭花鲜花在18倍占芭花鲜花重量的65％乙醇中回流提取1.5h，过滤得到滤渣A和滤液A；

(2)将滤渣A在10倍占芭花鲜花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，过滤得到滤渣B和滤液B；

(3)将滤渣B在8倍占芭花鲜花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，过滤得到滤渣C和滤液C；

(4)将滤液A、滤液B和滤液C混合均匀后浓缩至占芭花鲜花5倍重量，得占芭花提取液。