[发明专利]一种中药鹅不食草二倍半萜类单体的制备及其应用

说明书

本发明公开了一种中药鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯的制备及其应用。通过运用先进的植化提取、分离方法，从中药鹅不食草中分离出二倍半萜类单体心菊内酯，并通过实验证明其可有效减轻肝脏病理损伤、抑制胶原沉积、抗炎、抗脂质过氧化，对肝纤维化具有明显的保护作用。

技术领域

本发明涉及一种药物的制备方法及应用，具体来说，涉及鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯的提取、分离方法；心菊内酯的抗炎、抗脂质过氧化及对肝纤维化的保护作用。

背景技术

鹅不食草(Centipedae Minima(L.)A.Braun et Aschers.)系菊科石胡荽属植物的干燥全草。本发明对鹅不食草进行了大量的药学、药效学研究，发现鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯对四氯化碳(CCl₄)诱导的大鼠肝纤维化具有明显的保护作用。进一步地研究发现，心菊内酯能够显著改善肝脏病理学改变；减少肝脏胶原沉积；降低白细胞介素-6(IL-6)、人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化氢酶(MPO)等炎症因子表达；增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和谷胱甘肽还原酶(GSH-GR)的活性；其机制可能与上调miR-200a基因表达有关。

目前，尚未发现有把鹅不食草活性部位制成药学制剂并用于临床的报告。

发明内容

本发明是对中药鹅不食草的深度开发，通过中药现代化的思维模式，以药理活性为靶点，运用先进的提取、分离技术获得鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯，并进一步明确其作用机制，为肝纤维化治疗提供了化学结构明确、高效的新型化合物。

本发明采用的技术方案如下：

1、从中药鹅不食草中提取、分离出二倍半萜类单体心菊内酯，

2、鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯对肝纤维化的保护作用的实验；

3、中药鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯在制备治疗肝纤维化药中的应用。

4、中药鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯在制备治疗炎症药中的应用。

本发明通过运用先进的植化提取、分离方法，从中药鹅不食草中分离出二倍半萜类单体心菊内酯，并证明其可有效减轻肝脏病理损伤、能够显著改善抑制胶原沉积、抗炎、抗脂质过氧化，对肝纤维化具有明显的保护作用。

具体实施方式

一、鹅不食草二倍半萜类单体心菊内酯的制备

提取分离方法：取5kg鹅不食草干燥全草，粉碎，95％乙醇加热回流提取3次，每次2h，合并3次乙醇提取液，减压除去乙醇，得到鹅不食草乙醇浸膏880g。取乙醇浸膏加适量蒸馏水重悬，0.45um滤头过滤，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得乙酸乙酯萃取物126.8g。以硅胶(1.5kg，200-300目)柱色谱柱分离，PE：EtOAc(7:1,4:1，3:1，2:1，1:1，1:2)，EtOAc，EtOAc(5％MeOH)，EtOAc(10％MeOH)，EtOAc(20％MeOH)梯度洗脱，薄层色谱收集相同馏分，其中，第八馏分再经硅胶柱(氯仿：甲醇，90:10)和Sephadex LH-20柱(甲醇：水，1:1)进一步分离纯化，最后得到白色晶体25.8mg。