[发明专利]酮还原酶在制备(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的用途及制备

说明书

本发明提供了一种(S)‑1,1‑二(4‑氟苯基)‑2‑丙醇的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：在反应体系中，利用酮还原酶催化式2化合物即得式1化合物：(S)‑1,1‑二(4‑氟苯基)‑2‑丙醇，所述式2化合物的结构式如说明书中所述。本发明还提供了一种酮还原酶、所述式2化合物、1,1‑二(4‑氟苯基)‑1,2‑丙二醇、和/或乳酸乙酯在制备(S)‑1,1‑二(4‑氟苯基‑2‑丙醇)或吡啶酰胺类杀菌剂Florylpicoxamid中的用途。本发明所述的制备方法用酶催化的方法替代现有技术中的化学方法，使用原料成本降低，生产工艺更加环境友好，所制备得到的产品立体选择性高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地，本发明涉及一种酮还原酶在制备(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇中的用途及制备的方法。

背景技术

Florylpicoxamid是陶氏益农公司开发的第2代吡啶酰胺类杀菌剂，该产品可用于作物多个生长阶段，并能提高作物产量和品质。Florylpicoxamid的结构式如下式A所示。

WO2018009618A1报道了Florylpicoxamid的制备方法，具体过程如图1所示，具体为：(R)-乳酸乙酯与对氟苯基溴化镁反应制得化合物H，化合物H经还原成化合物K，K再与G酯化为L，L再经水解，与吡啶羧酸化合物B酰胺化得到Florylpicoxamid。其中K化合物(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇是其重要中间体，此方法中采用化学还原手性H化合物制得化合物K的方法，此方法中采用化学还原方法，采用原料手性乳酸乙酯，还原剂和TFA-DCM(三氟乙酸-二氯甲烷)价格较高，且环境污染严重，因此寻找成本较低，环境友好，高效的制备中间体(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的方法至关重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是现有的制备(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的方法原料成本高、环境污染严重等问题，因此本发明提供了一种(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的制备方法及酮还原酶在制备(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的用途。本发明所述的制备方法用酶催化的方法替代现有技术中的化学方法，使用原料成本降低，生产工艺更加环境友好，所制备得到的产品立体选择性高。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：在反应体系中，利用酮还原酶催化式2化合物即得式1化合物：(S)-1,1-二(4-氟苯基)-2-丙醇；

较佳地，所述酮还原酶为来源于Saccharomyces cerevisiae S288C的酮还原酶。更佳地，所述酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:7或其突变所示；其中所述突变在如SEQID NO:7所示的氨基酸序列上具有一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或插入，并且保持或改善了所述酮还原酶的功能；所述突变的氨基酸序列优选与如SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％更优选至少99％的序列同源性。进一步更佳地，所述酮还原酶的氨基酸序列由如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列编码。

较佳地，所述酮还原酶的浓度为0.5-5U/mL，更佳地，所述酮还原酶的浓度为1.90U/mL。

较佳地，所述式2化合物的浓度为10-100g/L；更佳地，所述式2化合物的浓度为50g/L。

较佳地，所述反应体系中还包括还原型辅酶。

更佳地，所述还原型辅酶优选NADH、NADPH和/或FADH₂。

更佳地，所述还原型辅酶的浓度优选0.5～5mM；更优选1mM。