[发明专利]一种发酵高产大环内酰胺化合物的海洋小单孢菌株及应用

说明书

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种发酵高产大环内酰胺化合物的海洋小单孢菌株及其应用。本发明通过对现有发酵产大环内酰胺化合物FW05328‑1的海洋小单孢菌株FIM05‑328进行诱变育种，获得一株能够高产大环内酰胺化合物FW05328‑1的突变株Micromonospora sp.FIM‑MA181224。该菌株能有效提高发酵液中化合物FW05328‑1的含量，在10L‑500L发酵罐的发酵实验中，Micromonospora sp.FIM‑MA181224发酵产生化合物FW05328‑1的效价达到249.8mg/L，与原始菌株FIM05‑328的发酵效价相比，大幅度提高了大环内酰胺化合物FW05328‑1的产生能力，为FW05328‑1的工业化生产和后续临床推广提供了有利支持。

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种发酵高产大环内酰胺化合物的海洋小单孢菌株及其应用。

背景技术

近年来，肿瘤的发病率及死亡率呈上升趋势，癌症已成为严重危害人类健康的第一杀手。目前，肿瘤的治疗仍以药物治疗为主，因此，抗肿瘤药物的研发具有巨大的市场前景，而不断研究开发新的高效低毒的抗肿瘤药物具有重要意义。

微生物资源为创新药物研究提供无穷的源泉，从微生物次生代谢产物中寻找有活性的化合物作为先导化合物创制新药是世界药学工作者公认的有效途径之一。微生物丰富多样的次生代谢产物为化学药物新药研究与开发提供了大量极为珍贵的模式结构和药物前体小分子，是药物发现源头创新和持续创新的重要物质基础，对整个创新药物的研究具有决定性意义。

福建省微生物研究所于2017年首次报道了从海洋小单孢菌FIM05-328的微生物次级代谢产物中分离到一个新结构的26元多烯大环内酰胺类化合物FW05328-1(详见中国专利CN107287131A)，并对化合物FW05328-1的结构进行鉴定，以及对化合物FW05328-1的生物活性进行初步研究。

研究发现，该大环内酰胺化合物FW05328-1是一个新结构的化合物，其在体外对人食管鳞癌细胞株KYSE30、KYSE180、EC109具有优良的抑制活性，对人食管鳞癌细胞株EC109的抑制活性尤为突出，与结构相似物Salinilactam A及药物顺铂相比，其抑制活性分别是Salinilactam A的165倍、顺铂的95倍，使其成为具有较好研究前景的抗肿瘤药物先导物。

但是，FW05328-1作为新结构化合物，在该化合物的在先研究中，仅限于对摇瓶发酵工艺的初步发酵研究，且其整体发酵效价极低，对后续提取工艺极为不利，难以应用于大规模发酵生产。现有研究中尚无关于大环内酰胺化合物FW05328-1规模化发酵生产工艺的研究及报道，为其后续应用造成了极大的限制。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一株发酵高产大环内酰胺化合物FW05328-1的海洋小单孢菌株，以解决现有技术中FW05328-1化合物的发酵产量较低的问题；

本发明所要解决的第二个技术问题在于提供一种利用上述菌株发酵生产大环内酰胺化合物FW05328-1的方法。

为解决上述技术问题，本发明所述的一种海洋小单孢菌菌株，其分类命名为Micromonospora sp.FIM-MA181224，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17139。

本发明所述海洋小单孢菌是以保存的海洋小单孢菌FIM05-328(详见中国专利CN107287131A，保藏编号为CGMCC NO.13933)为出发菌株进行多轮诱变获得。

本发明还公开了所述的海洋小单孢菌株在发酵生产大环内酰胺化合物中的应用。

具体的，所述大环内酰胺化合物包括具有如下结构的化合物FW05328-1：