[发明专利]一种基于点击化学的标记配体组合物、试剂盒及系统

说明书

本申请涉及化学及生物医学技术领域，具体公开了一种基于点击化学的标记配体组合物、试剂盒及系统，该基于点击化学的标记配体组合物，包括：配体，含有叠氮基团或叠氮反应基团中的一种；信号蛋白，含有叠氮基团或叠氮反应基团中的另一种；其中，通过叠氮基团与叠氮反应基团之间的点击化学反应，信号蛋白连接配体，以形成标记配体。通过上述方式，本申请能够解决现有技术中采用异双功能交联剂对两种蛋白质进行标记时，普遍存在标记不稳定、标记效率低、标记批间差异大、标记成本高的问题。

技术领域

本申请涉及化学及生物医学技术领域，特别是涉及一种基于点击化学的标记配体组合物、试剂盒及系统。

背景技术

探索和发现生物体内及生命过程中蛋白质、核酸、多肽等重要生物分子的高灵敏分析检测方法，是生物医学领域研究的热点和难点。生物标记技术是该领域不可或缺的研究手段。通用的生物标记方法可以分为放射性标记、显色标记、酶标记和荧光标记等。生物标记技术是一项具有挑战性的工作,它要求这类化学反应能够在生理条件下高效特异地进行,不会与生物体系中存在的各种活性物质发生副反应。

发明内容

本申请主要解决的技术问题是提供一种基于点击化学的标记配体组合物、试剂盒及系统，解决了现有技术中采用异双功能交联剂对两种蛋白质进行标记时，普遍存在标记不稳定、标记效率低、标记批间差异大、标记成本高的问题。

为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种基于点击化学的标记配体组合物，包括：配体，含有叠氮基团或叠氮反应基团中的一种；信号蛋白，含有叠氮基团或叠氮反应基团中的另一种；其中，通过叠氮基团与叠氮反应基团之间的点击化学反应，信号蛋白连接配体，以形成标记配体。

其中，叠氮反应基团包括：与叠氮基团形成三氮唑环的炔烃、或者与叠氮基团形成二氮杂环的环烯烃。

其中，信号蛋白包括碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、藻红蛋白、藻蓝蛋白、藻红蓝蛋白或别藻蓝蛋白中的至少一种。

其中，配体为抗体、抗原、半抗原-载体偶联物或者亲和素中的至少一种。

其中，抗体包括血管紧张素I抗体、NT-ProBNP抗体、肌钙蛋白抗体、甲胎蛋白抗体、癌胚抗原抗体、HIV抗原抗体、乙肝表面抗原抗体、甲状腺球蛋白抗体、肌钙蛋白I或T抗体或肌红蛋白抗体中的至少一种；抗原包括：血管紧张素I抗原、NT-ProBNP抗原、肌钙蛋白抗原、甲胎蛋白抗原、癌胚抗原抗原、HIV抗原抗原、乙肝表面抗原抗原、甲状腺球蛋白抗原、肌钙蛋白I或T抗原或肌红蛋白抗原中的至少一种；半抗原-载体偶联物包括醛固酮以及醛固酮半抗原蛋白偶联物、HA透明质酸以及透明质酸半抗原蛋白偶联物、血管紧张素I-载体偶联物、血管紧张素II-载体偶联物或HABP透明质酸结合蛋白中的至少一种。

为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种基于点击化学的标记配体组合物的制备方法，用于制备如上述的标记配体组合物，制备方法包括：提供一配体和信号蛋白；用第一点击化学试剂对配体进行标记，其中，第一点击化学试剂含有叠氮基团或叠氮反应基团中的一种；用第二点击化学试剂对信号蛋白进行标记，其中，第二点击化学试剂含有叠氮基团或叠氮反应基团中的另一种；将标记后的配体与标记后的信号蛋白进行点击化学反应，以信号蛋白连接配体，形成标记配体组合物。

其中，第一点击化学试剂和第二点击化学试剂包括DBCO试剂、Tetrazine试剂、Azide试剂、Alkyne试剂或TCO试剂中的至少一种。

为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种试剂盒，试剂盒包括：试剂盒本体；第一试剂容纳位，设置在试剂盒本体上，用于容置至少一种如前述标记配体组合物；第二试剂容纳位，用于容置至少一种免疫检测组合物，免疫检测组合物与标记配体组合物配合，得到检测复合物。

其中，标记配体组合物为标记抗体组合物；免疫检测组合物包括捕获抗体组合物和/或标记抗原。