[发明专利]壮药白花九里明HPLC指纹图谱的建立方法

说明书

本发明属于中药材指纹图谱领域，具体涉及一种壮药白花九里明HPLC指纹图谱的建立方法。所述壮药白花九里明HPLC指纹图谱的建立方法，以白花九里明主要成分咖啡酸为参照物，据此获得壮药白花九里明共有模式指纹图谱。指纹图谱共有色谱峰10个，能够充分反应白花九里明药材中化学成分，信息量较丰富，方法重现性良好，对控制药材质量和鉴别药材优劣提供了更有力的理论依据，提高了壮药白花九里明的质量控制和真伪鉴别水平，实现了快速，准确地鉴别白花九里明的真伪优劣。

【技术领域】

本发明涉及中药材指纹图谱领域，具体涉及一种壮药白花九里明HPLC指纹图谱的建立方法。

【背景技术】

白花九里明为菊科艾纳香属植物Blumea megacephala(Randeria)Chang etTseng的地上部分，产于云南、四川、贵州、广西、广东、湖南南部、江西南部、福建及台湾等省区。白花九里明在广西壮族民间常用水煎服治疗产后流血过多。

中药指纹图谱(fingerprinting)是借用DNA指纹图谱发展而来。最先发展起来的是中药化学成分色谱指纹图谱，特别是高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。HPLC具有很高的分离度，可把复杂的化学成分进行分离而形成高低不同的峰组成一张色谱图，这些色谱峰的高度和峰面积分别代表了各种不同化学成分和其含量。中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。

目前壮药白花九里明主要进行了性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和含量测定等，这些方法存在信息量小、样品化学成分体现不全面、鉴别成分数量不足等问题，因此无法表现壮药白花九里明整体质量。如宁小清等(宁小清,卢汝梅,黄丽贞等.壮药白花九里明化学成分研究[J].中药材,2016,39(11):2536-2538.)对白花九里明有效成分进行研究，对儿茶酸、绿原酸和咖啡酸含量进行了测定。其仅以其中几种成分的含量为指标确定药材的质量优劣。然而，壮药(中药)具有复杂的化学成分，有效成分多，未知成分多，不同成分或功效之间相互影响，任何一种活性成分都无法全面的反映该药的总体质量与疗效，所以很难仅依靠一种或几种成分来评价中药的有效性和专属性。

美国食品与药品管理局(FDA)在有关植物药物质和植物药产品部分，已将指纹图谱引入质量控制中；世界卫生组织(WHO)在其草药评价指南中指出，不能鉴别的植物药质谱和最终产品的有效成分，可采用色谱指纹图谱鉴别特征成分或混合成分，保证产品质量的一致性。

目前国内外对壮药白花九里明指纹图谱的研究尚未见任何报道，本发明对壮药白花九里进行高效液相指纹图谱研究，弥补了白花九里明质量标准项下的空白，为白花九里明药材的质量评价提供了依据，并为更加科学、合理、规范地使用白花九里明，提高其临床用药的安全性提供了参考。

【发明内容】

本发明的目的是提供一种壮药白花九里明HPLC指纹图谱的建立方法。所述方法能够为白花九里明的鉴别和质量控制提供可靠依据。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种壮药白花九里明HPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取咖啡酸对照品，加甲醇溶解制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：精密称取壮药白花九里明药材粗粉，加水，超声提取，放冷至室温，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(3)高效液相色谱测定：分别精密吸取步骤(1)的对照品溶液与步骤(2)的供试品溶液各10-20μl注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，以咖啡酸色谱峰为参照峰，通过分析比较确定特征共有峰，即得所述白花九里明HPLC指纹图谱；

其中，色谱条件为：以C18烷基键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以磷酸溶液为流动相B组成的梯度洗脱液进行梯度洗脱；检测波长为300-350nm。