[发明专利]CD47检测试剂在制备结直肠癌对抗EGFR单抗耐药诊断剂方面的应用

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及CD47的检测试剂在制备肿瘤对抗EGFR单抗耐药的诊断试剂盒中的应用和一种肿瘤对抗EGFR单抗耐药的诊断试剂盒。本发明研究发现，与对抗EGFR单抗敏感型的结直肠癌细胞相比，对抗EGFR单抗耐药型的结直肠癌细胞中CD47的表达水平上调，CD47表达上调的耐药细胞导致巨噬细胞对其吞噬作用明显降低，肿瘤细胞发生免疫逃逸，降低抗EGFR单抗的疗效。本发明将CD47作为结直肠癌对抗EGFR单抗耐药的生物标记物，为临床上抗结直肠癌的药物选择提供有效提示，同时通过药物选择高效治疗结直肠癌。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及CD47的检测试剂在制备肿瘤对抗EGFR单抗耐药的诊断试剂盒中的应用和一种肿瘤对抗EGFR单抗耐药的诊断试剂盒。

背景技术

结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是最常见和高致死率的恶性肿瘤之一，在世界范围内，其发病率高居第4位，致死率高居第5位。近年来，CRC的发病率和死亡率在中国都呈上升趋势，据《2017年中国肿瘤登记年报》数据显示，中国的CRC发病率高居第5位。手术加以放化疗的综合治疗仍是目前CRC的治疗手段。近年来，随着对肿瘤细胞信号转导通路研究的不断深入，针对肿瘤特异信号转导通路的靶向治疗，已成为肿瘤治疗的一个高效方法，是当今所提倡的精准医疗中的一个重要及热门手段，靶向治疗手段使得肿瘤治疗的有效性和特异性都得到了提高。表皮生长因子受体(Epithelial Growth Factor Receptor,EGFR)为跨膜酪氨酸激酶受体，与不同配体结合发生磷酸化而被激活，从而进一步激活下游RAS/RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR等信号转导通路，促进肿瘤发生发展；由于60～80％的CRC病人存在EGFR高表达，EGFR作为有效的靶点已被运用于临床用以治疗CRC，现CRC临床上得到广泛认可及使用的靶向EGFR的药物为抗EGFR单抗，包括西妥昔单抗(Cetuximab)和帕尼单抗(Panitumumab)，两种单抗通过抑制EGFR通路，抑制CRC细胞增殖，诱导癌细胞凋亡，发挥抗肿瘤的作用。尽管Cetuximab和Panitumumab的使用让CRC患者的中位生存期显著得到提高，然而，由于耐药问题，EGFR靶向药物在临床上的有效率仅为8-23％。

发明内容

本发明目的之一在于提供一种CD47检测试剂在制备肿瘤对抗EGFR抗体耐药的诊断试剂/试剂盒中的应用。

本发明目的之一在于提供一种肿瘤对抗EGFR单抗耐药的分子标记物。

本发明另一个目的在于提供一种肿瘤对抗EGFR抗体耐药的诊断系统。

为了解决以上技术问题，开发对抗EGFR单抗耐药的诊断试剂盒显得十分有必要，这有助于为临床上抗结直肠癌的药物选择提供有效提示，同时通过药物选择高效治疗结直肠癌。

当结直肠癌病人KRAS和BRAF基因发生突变时，病人会对抗EGFR单抗产生耐药，然而，仍有一大部分病人当KRAS和BRAF为野生型时，也会对抗EGFR单抗产生耐药，说明结直肠癌病人对抗EGFR单抗耐药还存在很多其它原因。随着对肿瘤免疫微环境的深入研究，包括免疫检查点分子抑制剂、免疫细胞治疗、肿瘤疫苗等免疫治疗策略不断涌现，使肿瘤免疫治疗获得了快速发展，已成为肿瘤治疗的又一新兴高效方向。针对免疫检查点分子抑制剂的开发更是迅速，靶向细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4的伊匹木单抗、靶向于程序性细胞死亡蛋白-1的纳武单抗和靶向于程序性细胞死亡蛋白配体1(programmed death-ligand1，PD-L1)的阿特珠单抗已被美国食品药品管理局批准用于肿瘤治疗。此外，越来越多的研究表明，肿瘤免疫微环境在肿瘤耐药中起着重要作用。