[发明专利]一种利用三氯生筛选直线形螺旋藻藻丝的方法

权利要求书

1.一种利用三氯生筛选直线形螺旋藻藻丝的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取适量兼具螺旋形和直线形两种藻丝的螺旋藻藻液，用Zarrouk培养液将其浊度T稀释至0.2；

（2）将稀释后的藻液等量分装为多份，分别加入含梯度浓度三氯生的Zarrouk培养液，将藻液的浊度T稀释至0.1；静置培养70 天后，选择呈蓝绿色的藻液，取其中三氯生浓度最高的一组，其该组藻液中的藻丝全部是直线形藻丝；

所述含梯度浓度三氯生的Zarrouk培养液是指：Zarrouk培养液有多份且均含三氯生，所含三氯生的浓度以0.25 mg/L为递增梯度；其配制方法为：

先称取100 mg 三氯生溶于100 ml的0.5 mol/L NaOH溶液中，配制成含量为1 g/L 的三氯生母液；再依次取0.50 mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、2.50 mL、3.00 mL、3.50 mL、4.00 mL 母液，分别加入8只盛有950 mL Zarrouk培养液的1 L容量瓶中，并用Zarrouk培养液定容至1 L，配制成三氯生含量依次为0.50 mg/L、1.00 mg/L、1.50 mg/L、2.00 mg/L、2.50 mg/L、3.00 mg/L、3.50 mg/L、4.00 mg/L 的Zarrouk培养液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的静置培养条件为：以40 W日光灯为光源，培养液面的光照强度为54 μmol photons · m^-2 · d^-1；按光照12 h和黑暗12h交替的方式控制光照条件，光照时温度28 ℃、黑暗时温度20 ℃。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，用分光光度计测定藻液浊度T用于表征螺旋藻生物量，设定分光光度计的波长为560 nm、用10 mm比色皿、以Zarrouk培养液作空白对照。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，按下述方法预估藻液和Zarrouk培养液的取用体积：设螺旋藻藻液的起始浊度为T₁，体积为V₁；拟配制目标藻液的浊度为T₂，体积为V₂；拟添加Zarrouk培养液的体积为V₂-V₁；依据线性稀释原理，由T₁×V₁=T₂×V₂，得V₁= (T₂×V₂)/T₁，再由(V₂-V₁)求出添加Zarrouk培养液的量。