[发明专利]钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法

权利要求书

1.钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：包括，

在所述盐胁迫环境下，对螺旋藻进行耐盐驯化培育的工序；

将所述驯化培育后的螺旋藻置于氧分压上升的环境中进行细胞分化培育的工序；以及，

进一步扩大化培育，并收集所得耐盐耐氧性螺旋藻的工序；

所述氧分压上升的环境是包括在低氧分压和更高的氧分压下进行细胞培养的环境；所述低氧分压环境中氧含量为0.1-5％，更高的氧分压环境中氧含量为5.1-7.5％；

所述盐胁迫环境中初始盐浓度为0.1-1％，终止浓度为3.5-5％；

所述驯化培育及扩大化培育的培育条件为：光照：昼8000-15000lx/夜0-5000lx，光/暗周期为12h/12h，培育周期皆为5-7d；所述分化培育的培育条件为：光照：昼25000-32000lx/夜0-8000lx，光/暗周期为12h/12h，培育周期为7-10d。

2.根据权利要求1所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述耐盐驯化培育采用盐浓度递增的培育方法，所述盐浓度以0.5％的浓度梯度递增，盐浓度增加间隔时间为24-36h。

3.根据权利要求1所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述驯化培育及扩大化培育用培养液中HCO₃^-的浓度为2-3g/L，CO₃^2-的浓度为9-10.5g/L；所述分化培育用培养液中HCO₃^-的浓度为3.5-4.5g/L，CO₃^2-的浓度为11-12g/L。

4.根据权利要求1所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述培育用培养液中包括浓度分别为20-50mg/L的聚戊烯醇提取物和10-30mg/L的4-羟基丁酸钠。

5.根据权利要求4所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述聚戊烯醇提取物为经HPLC分析，纯度为75-95％的聚戊烯醇提取物；所述聚戊烯醇提取物提取原料为南方红豆杉。

6.根据权利要求5所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述聚戊烯醇提取物通过以下步骤制备：取南方红豆杉粉碎针叶用石油醚于80-90℃下提取8-10h后，收集提取液，并用浓度为5％的氢氧化钠甲醇溶液水解除杂，再用丙酮冷析除杂，即得。

7.根据权利要求6所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述水解除杂操作条件为：温度为60-80℃，震荡转速为200-250rpm/min，时间为2-3h；所述冷析除杂操作条件为：温度为0-4℃，时间为6-8h。

8.根据权利要求6所述的钝顶螺旋藻在盐胁迫环境下的培育方法，其特征在于：所述氢氧化钠甲醇溶液中含有0.05-0.1wt％焦没食子酸和0.03-0.05wt％的肉桂酸。