[发明专利]一种恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07、制备方法及用途

说明书

本发明公开了一种恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07、制备方法及用途。所述恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为CGMCC No.17760。本发明通过微生物法将泔水油转化为具有环境亲和性的可生物降解塑料PHA，既可以实现泔水油资源化利用与无害化处理，又可降低PHA的制备成本，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及领域微生物领域，具体涉及恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07、制备方法及用途。

背景技术

聚羟基脂肪酸酯(PHA)是微生物在碳源过剩、氮源不足的不平衡生长状态下作为胞内碳源和能源被储存的一种高分子聚合物，以疏水性颗粒形式广泛存在于微生物细胞中。其由于与传统的以石油为原料合成的塑料如聚乙烯、聚丙烯等有相似的材料学性质，而且可由可再生能源如碳水化合物、脂肪酸等合成，其结构具有多样性，并且可以完全降解进入自然界的生态循环而得到越来越多的重视。此外，PHA是在细菌体内合成，这保证了它的立体特异性(在主链上所有的手性碳原子都是R－构型)，这对于PHA的生物降解性以及生物相容性非常重要。目前，PHA已经被认为是一种“绿色塑料”、“环境友好塑料”，可以替代传统不可降解塑料，因此引起了世界各国科学界和产业界越来越多的重视。它具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性、生物相容性、光学活性、压电性、气体相隔性等许多优秀性能。

目前在生物安全和环境友好方面PHA已得到业界的普遍认可，但是PHA的生产成本仍然较高，由此制约了其大规模工业化生产和商业应用开发。PHA的成本主要包括，原料成本、生产能耗和提取加工三个方面，所以降低成本实现PHA的工业化生产，需要努力从原料、生产、提取工艺等方面进行优化。生产成本高是目前限制聚羟基脂肪酸酯应用的主要原因，而原料成本高是这其中的关键因素。在PHA生产链中，选择合适可再生资源作为碳源是成本的决定性因素，因为碳源成本在整个生产成本中占50％以上。CO₂是最理想的碳源，但是不好利用,碳源最好首先是可以循环利用的碳水化合物和脂肪等。目前PHA主要是利用微生物发酵法进行生产，而工业上规模化生产所使用的碳源主要是蔗糖，葡萄糖或者小分子有机物，其成本占总成本的28～50％。选择可替代性的廉价碳源可以减低PHA的生产成本。餐厨废油中的泔水油主要源自餐饮业泔水处置过程中分离的废弃油脂，其主要成分是动植物油脂，其化学成分主要为脂肪酸甘油酯。动植物油脂在烹制食物过程中，与空气中的氧气接触，在高温环境下发生水解、氧化、聚合等反应，使油中原有的不饱和脂肪酸含量减低，并产生了一些具有致癌作用的聚合物如多种醛、酮、内脂等恶臭物质；由于近年来对厨余垃圾管理越发严格，大部分餐饮机构产生的厨余垃圾都汇集到餐厨垃圾处理厂，因而泔水油的收集和管理更加容易，数量也较为巨大，如何实现泔水油的资源化利用与无害化处理已经成为人们关注的焦点。发明专利201510203237.4公开了一种利用高效菌将餐厨废油合成PHA的工艺方法，采用钩虫贪铜菌Cupriavidus necator(DSM428)，以餐厨废油作为碳源，进行培养，将餐厨废油合成得到PHA，该方法采用的钩虫贪铜菌，其工艺过程相对复杂，成本较高。而且由于泔水油成份复杂，因此以其作为单一碳源来转化合成PHA的方法依然不足。

发明内容

本发明的目的在于提供一种恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07。

为实现上述目的，本发明提供一种恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07，其保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为CGMCC No.17760。

本发明还提供一种制备所述恶臭假单胞菌Pseudomonas putida WP07的方法，其特征在于，包括如下步骤，

菌株的驯化：将泔水油以20g/L的比例添加到无机盐培养基中，再从富含油脂的环境中获得土壤样品并以5g/L的比例添加到上述无机培养基中进行培养驯化，获得驯化后的培养物；优选的，富含油脂的环境为食堂排烟口土壤和餐厨垃圾堆存处土壤；