[发明专利]一类来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一类来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物，其特征在于，结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述的来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物，其特征在于，所述5-15环二倍半萜化合物是从小麦根腐平脐蠕孢菌BS11134经过发酵培养分离获得；

其中，所述小麦根腐平脐蠕孢菌BS11134的保藏号为CGMCC NO.17767。

3.一种权利要求2所述的来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将固体发酵培养基灭菌，然后将体积百分比为5％的种子液接种于固体发酵培养基，于28℃静置培养，40d后收获固体发酵物，固体发酵物为容器内的所有物质，将上述固体发酵物经过分离纯化获得所述来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物。

4.根据权利要求3所述的来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物的制备方法，其特征在于，所述固体发酵培养基为大米：水＝2:3；

其中，大米按重量计量，水按体积计量；

所述种子液的制备方法如下：在多个玻璃瓶中分别装入种子培养基灭菌，使用含有小麦根腐平脐蠕孢菌的平板菌种由平板挖块接种，于28℃在旋转摇床旋转培养48h，得到种子液。

5.根据权利要求4所述的来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物的制备方法，其特征在于，所述种子培养基由以下成分组成：土豆提取物、葡萄糖、琼脂和水；以上成分在所述种子培养基中浓度分别为：土豆提取物200g/L、葡萄糖20g/L和琼脂20g/L；

所述含有小麦根腐平脐蠕孢菌的平板菌种的培养方法为：

将平板培养基灭菌制成平板，于37℃恒温培养3d，至表面水分稍干，无杂菌生长时，将小麦根腐平脐蠕孢菌菌种孢子接种于平板培养基，于28℃培养7d，外观为墨绿至黑色，气生菌丝丰满，无染菌时即可收取使用，即得到平板菌种。

6.根据权利要求5所述的来源于植物病原真菌的5-15环二倍半萜化合物的制备方法，其特征在于，所述平板培养基是由以下成分组成：土豆提取物、葡萄糖、琼脂和水；以上成分在所述平板培养基中浓度分别为：土豆提取物200g/L、葡萄糖20g/L和琼脂20g/L；

所述小麦根腐平脐蠕孢菌的分离方法如下：

将新鲜草地早熟禾叶片部位植物样品用无菌水清洗干净，用吸水纸吸干表面水分后剪成小片做表面消毒处理，将上述表面消毒后的材料剪切成小块，放入含有菌株分离培养基的平板中28℃恒温培养3d～15d，培养至观察到实验组组织块边缘有少量菌丝产生，及时采用菌丝尖端挑取法将其转入另一培养平板中培养；

所述菌株分离培养基的配制方法如下：

土豆提取物200g/L、葡萄糖20g/L和琼脂20g/L，高温灭菌，在制备平板时加入青霉素100mg/L和链霉素200mg/L的混合液20mL。