[发明专利]一种在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法

权利要求书

1.一种在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)根瘤菌培养：将根瘤菌接种到平板培养基上，在25-30℃条件下培养24-36h得到根瘤菌菌落，超净台内用无菌水冲洗菌落，得到平板菌体液；将平板菌体液接种到液体培养基中，在温度为25-30℃条件下摇床上培养24-36h，得到液体发酵种子；将液体发酵种子接种入发酵培养基进行发酵培养，得到根瘤菌发酵液；将所述根瘤菌发酵液进行离心，得到菌体分散于PBS溶液中，制得根瘤菌菌液；

(2)非豆科植物幼苗培育：将非豆科植物的种子置于无菌培养皿中，培养催芽后移植于植物培养液中，于光照条件下培养至长出幼苗，移植至培养土中；

(3)将步骤(1)所述根瘤菌菌液接种于步骤(2)所得幼苗的根部。

2.根据权利要求1所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，步骤(1)中，所述平板培养基、液体培养基和发酵培养基均为NA培养基，所述NA培养基的成分为蛋白胨8-12重量份、牛肉粉4-6重量份、氯化钠1-5重量份、水76-88重量份。

3.根据权利要求2所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，所述平板培养基的成分还包括琼脂粉16-20重量份。

4.根据权利要求2所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，所述NA培养基的pH值为7.0-7.2。

5.根据权利要求2所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，步骤(1)中，所述液体发酵种子的接种量为占培养基体积4-6％。

6.根据权利要求2所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，步骤(1)中，进行所述发酵培养的条件为：在28-32℃条件下培养24-28h，搅拌速度为140-180r/min，通气量为40-50％。

7.根据权利要求1所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，步骤(2)中，所述光照条件为每天光照6-8h；所述植物营养液的pH为6.2-6.5。

8.根据权利要求1所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，步骤(2)中，所述植物营养液的组成为去离子水60-80重量份、硝酸铵10-20重量份、磷酸二氢钾10-20重量份、硝酸钾1-5重量份、硝酸钙1-5重量份、过磷酸钙1-5重量份、硫酸镁1-5份、助剂2-4重量份、滑石粉10-20重量份、萘乙酸0.5-1.5重量份。

9.根据权利要求5所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，所述助剂包括等质量量的硼酸、硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、钼酸铵、硫酸亚铁。

10.根据权利要求1所述的在非豆科作物中使用根瘤菌的种植方法，其特征在于，步骤(3)中，所述根瘤菌菌液处理幼苗时，每隔6-8天接种一次。