[发明专利]箭筈豌豆ILP分子标记引物及在品种鉴定中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及箭筈豌豆ILP分子标记引物及在品种鉴定中的应用，本发明利用41对分子标记引物，可以对30种箭筈豌豆品种进行鉴定，鉴定品种多，并且具有准确、高效、快速、成本低以及操作方便等优势。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及箭管豌豆ILP分子标记引物及在品种鉴定中的应用。

背景技术

箭筈豌豆(Vicia sativa L.)是一种优质的一年生、自花授粉、二倍体豆科牧草，具有营养 成分高、蛋白质含量丰富、抗逆性强和种植区域广等特点，可用作绿肥、牧草和青贮饲料等， 在我国的农业生态系统中具有十分重要的地位。随着畜牧业的快速发展，箭管豌豆新品种的 选育和审定工作也进入一个崭新的阶段，而新品种的审定和品种真实性的鉴定方法还相对滞 后。目前，主要从形态学角度通过田间性状差异进行鉴别。但该方法受环境因子和主观因素 的影响太大，且周期过长，费时费力。另外，物种的遗传多样性及品种差异大部分表现在分 子水平上；相较于表型多态性，分子水平的多态性则具有更直观的差异性和更高的丰度。因 此，迫切需要在分子水平上开发一套行之有效且快速、精确、廉价的箭管豌豆品种鉴定技术。

近年来，随着分子生物学技术的发展，DNA分子标记技术被越来越多的应用于植物品种 鉴定中，包含AFLP、SSR、SNP等在内的数十种。同外显子相比，内含子具有更丰富的多态 性可用于遗传标记，内含子长度多态性(ILP)标记是其中较易被鉴定的标记类型。相较于其 它DNA分子标记，ILP分子标记具有数量丰富、特异性、共显性、操作简单等优点，目前已 广泛应用于基因指纹图谱构建、遗传育种、基因组作图、基因定位、物种亲缘关系鉴别、基 因库构建等方面，在牧草选育以及品种鉴定过程中扮演着十分重要的角色。

作为一种具有多种优良性质的分子标记，迄今为止，ILP标记已在包括水稻、玉米、小麦 等粮食作物中进行了开发和应用。而箭管豌豆由于全基因组数据的缺乏，相关研究尚未见报 道。随着高通量转录组测序的发展，在全转录组水平开发箭管豌豆ILP分子标记并研究其在 品种鉴定中的应用，对箭筈豌豆品种鉴定以及分子标记辅助育种具有重要意义。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种箭管豌豆ILP分子标记引物。

本发明的目的之二在于提供上述箭管豌豆ILP分子标记引物在箭管豌豆品种鉴定中的应 用。

本发明目的之三在于提供一种鉴定箭管豌豆的试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

箭筈豌豆ILP分子标记引物，所述分子标记引物包括如下41对，其正向引物和反向引物 的核苷酸序列具体如下：

(1)VsILP004：正向引物序列为SEQ ID NO.1，反向引物序列为SEQ ID NO.2；

(2)VsILP012：正向引物序列为SEQ ID NO.3，反向引物序列为SEQ ID NO.4；

(3)VsILP020：正向引物序列为SEQ ID NO.5，反向引物序列为SEQ ID NO.6；

(4)VsILP021：正向引物序列为SEQ ID NO.7，反向引物序列为SEQ ID NO.8；

(5)VsILP032：正向引物序列为SEQ ID NO.9，反向引物序列为SEQ ID NO.10；

(6)VsILP047：正向引物序列为SEQ ID NO.11，反向引物序列为SEQ ID NO.12；

(7)VsILP079：正向引物序列为SEQ ID NO.13，反向引物序列为SEQ ID NO.14；

(8)VsILP100：正向引物序列为SEQ ID NO.15，反向引物序列为SEQ ID NO.16；