[发明专利]一种化合物20(R)-人参皂苷Rg3的高效制备分离方法

说明书

本发明公开了一种高效直接水解制备分离化合物20(R)‑人参皂苷Rg3（ginsenoside Rg3，C₄₂H₇₂O₁₃，以下简称“Rg3”）的方法，具体涉及通过直接转化五加科人参属总皂苷一步法直接制备高纯度化合物Rg3的制备方法。具体制备方法包括：以氯化钡（BaCl₂）作反应催化剂，用乙酸水溶液与人参属总皂苷（如人参、西洋参和三七等）按比例混合，之后利用高温水浴反应制备人参皂苷Rg3粗品。利用不同乙醇浓度，不同水浴温度溶解，对所得所获的转化物进一步采用冷却、乙醇和乙酸乙酯溶剂法重结晶，制备高纯度Rg3的方法。本发明快速，高效，可有效节省Rg3的分离纯化时间，且经济安全，简便实用，得率高，可适合工艺化生产，极大地促进人参属植物有效成分的高效利用。

技术领域

本发明属于天然化合物制备分离领域，具体涉及一种高效水解人参总皂苷制备20(R)-人参皂苷Rg3的方法。

背景技术

人参皂苷Rg3（ginsenoside Rg3）是存在于人参中的一种四环三萜类皂苷，现代药理学证明，人参皂苷Rg3有很强的药用的价值，具有抗癌、抗肿瘤，调节神经系统，调节免疫功能，抑制衰老，对肝肾功能保护作用等多重药理活性（参见：Choi Y J, et al.Stimulation of DDX3 expression by ginsenoside Rg3 through the Akt/p53 pathwayactivates the innate immune response via TBK1/IKKε/IRF3 signaling, Curr Med Chem. 2014; 王青. 人参皂苷Rg3的抗肿瘤作用及其机制研究. 黑龙江医药, 2014, 27,296-300）。经临床试验表明，人参皂苷Rg3可有效抑制肝癌、肺癌、肠癌的生长，可明显改善临床症状，并制成抗癌新药上市，如“参一胶囊”，同时也有制成抗肿瘤的口服液及注射剂应用于临床。

然而，人参皂苷Rg3是一种稀有皂苷，在天然人参属植物中含量极低，质量百分比约为0.01~0.02%，经加工后才能大量产生；值得注意的是，人参皂苷Rg3天然存在两种构型，即20(S)-Rg3和20(R)-Rg3。经大量研究表明，R型药理活性明显强于S型，其药理活性是值得深入发掘的重点构型（参见：何波, 等. 20(R)-人参皂苷Rg-3对大鼠缺血再灌注后迟发性神经元损伤的保护作用. 时珍国医国药, 2016, 27, 35-38；李明晶, 等. 人参皂苷Rg3的研究进展. 中国老年学杂志, 2017, 37, 6000-6002），常见水解方式如酸、碱、酶及微生物等形式，通过水解人参皂苷可产生大量的人参皂苷Rg3。

其中，酸水解是制备人参皂苷Rg3最为常用的方法，经研究发现，当酸的强度、水解温度和水解时间控制不恰当时，容易造成水解不够或水解过度的现象，存在产率过低的问题。而且，目前酸水解一般先将人参皂苷进行分组得到二醇组人参皂苷后，再进行酸转化，但由于生产技术要求过高，常常会限制其应用和发展，并容易造成资源的浪费，且很难得到高纯度20(R)-人参皂苷Rg3，对其药理活性研究受到很大的限制。

例如：

CN 201210547486.1，公开一种利用人参总皂苷水解生产人参皂苷Rg3的方法，通过取人参总皂苷，用含乙醇体积-体积比为65%~70%、含乙酸质量-体积比为6%~8%的水溶液溶解，制成人参总皂苷质量-体积比为6%~7%的溶液，于水解罐中80~85℃水解90~100分钟。并结合大孔树脂脱盐、干燥后，所得干燥物人参皂苷Rg3质量比含量高20~30倍。

CN 201310654074.2，公布了一种快速非热制备稀有人参皂苷Rg3(S)的方法，涉及一种高压脉冲电场技术耦合酸水解制备方法，在常温下将人参皂苷Rb1酸性溶液混合均匀，酸度0.1~2%，电场强度为5~25kV/cm，脉冲数1~15，将有机溶剂离心，即可得到人参皂苷(S)-Rg3。