[发明专利]一株富硒乳酸菌及其筛选方法和富含白藜芦醇和有机硒的风味酸奶的制备方法

权利要求书

1.一株富硒乳酸菌，其特征在于：该乳酸菌分类命名为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）PDD-4株，于2019 年03月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17434。

2.一种权利要求1所述的富硒乳酸菌的筛选方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）乳酸菌的初步筛选及分离纯化

挑选传统发酵食品泡菜为样品进行稀释后，涂布于含有溴甲酚紫的MRS固体培养基平板，倒置培养于37~43℃培养箱36~48h，挑选出橙黄色的菌落，将筛选得到的具有典型乳酸菌菌落特征的单一菌落初步鉴定为乳酸菌，将初步确定的乳酸菌菌落在MRS固体平板上连续划线几次，挑取出形态单一的菌落活化后置于甘油保藏管中存放在-80℃冰箱中；

（2）目标菌株的筛选

将步骤（1）初步筛选的乳酸菌菌株经分离纯化后涂布于含有20-100mg/L Na₂SeO₃的MRS固体培养基平板上，倒置培养于37-43℃培养箱24~36h，挑选出在同等Na₂SeO₃浓度下菌落颜色呈现出乳白色或微红色的菌落；再涂布于含有20~50mg/L Na₂SeO₃ 的MRS固体培养基平板上，按上述条件培养，挑选出在同等Na₂SeO₃浓度下菌落颜色呈现出乳白色或微红色的菌落，继续分离纯化至单一菌落，进行革兰氏染色和生理生化特性鉴定，选取革兰氏阳性、H₂O₂酶为阴性的菌，即为富硒乳酸菌，该菌株分类命名为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）PDD-4株，于2019年03月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17434。

3.根据权利要求2所述的一株富硒乳酸菌的筛选方法，其特征在于所述的含有溴甲酚紫的MRS固体培养基的配制方法如下：将MRS肉汤52.24g，溴甲酚紫0.04g，琼脂粉0.1g~0.2g，溶于1L蒸馏水中，于121℃灭菌20min即可；所述的含有Na₂SeO₃的MRS固体培养基的配制方法如下：将MRS肉汤52.24g，琼脂粉0.1g~0.2g，溶于1L蒸馏水中，于121℃灭菌20min，待培养基冷却至55℃时，加入一定量Na₂SeO₃灭菌培养液，即可配制成所需浓度的固体培养基。