[发明专利]适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针、制备方法及应用

权利要求书

1.一种适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针，其特征在于：由去铁乳铁蛋白、Mn²⁺、PEG、CH1055组成，其中，去铁乳铁蛋白为载体，络合Mn²⁺并与PEG上的氨基和CH1055上的羧基偶联，分子之间通过醛基和氨基交联；

所述适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针的制备方法，包括以下步骤：

（1）取原料乳铁蛋白配置成一定浓度的水溶液，在15-25 ℃下用pH为2-6的酸溶液透析除去乳铁蛋白上的铁离子，冷冻干燥得到去铁乳铁蛋白Apo-Lf；

（2）将步骤（1）得到的Apo-Lf溶于一定量的锰盐和碳酸盐的混合溶液中，在20-30 ℃下搅拌至溶液变为悬浮液，然后用一定浓度的碳酸盐溶液和水分别透析除去杂质，冷冻干燥得到去铁加锰乳铁蛋白Lf-Mn²⁺；

（3）在无水无氧环境下，将一定量的PEG溶于DMF中，依次加入一定量的EDCI、NHS、所述步骤（2）得到的Lf-Mn²⁺、DIPEA室温搅拌至溶液为乳浊液，用水透析得到Lf-Mn²⁺-PEG乳浊液；

（4）在无水无氧环境下，将一定量的CH1055溶于DMF，然后依次加入一定量的HBTU、所述步骤（3）得到的Lf-Mn²⁺-PEG、DIPEA进行酰胺缩合反应，反应结束后用水透析反应溶液得到蓝色澄清透明的溶液，冷冻干燥得到Lf-Mn²⁺- PEG-CH1055；

（5）将Lf-Mn²⁺- PEG-CH1055加水配置成一定浓度的水溶液，避光超声，然后加入一定量的乙醇和戊二醛，搅拌，离心，得到包载的Lf-Mn²⁺-PEG-CH1055 NPs，即为所述适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针；

所述步骤（1）中，乳铁蛋白的浓度为50-80 mg/mL；

所述步骤（2）中，去铁乳铁蛋白和Mn²⁺的浓度比为1-2:3-6，碳酸盐浓度为0.05M-0.3M。

2. 根据权利要求1所述的适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针，其特征在于：所述双模态肿瘤成像纳米探针的粒径为150-170 nm。

3. 根据权利要求1所述的适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针，其特征在于：所述步骤（3）中，采用一端为氨基分子量为2000-5000的PEG，PEG溶于DMF的浓度为50-80mg/mL，EDCI的浓度为0.5-1mg/ mL，NHS的浓度为0.8-1.6mg/mL， Lf-Mn²⁺的浓度为40-50mg/mL，DIPEA的浓度为15-20μL/ mL。

4.根据权利要求1所述的适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针，其特征在于：所述步骤（4）中，CH1055的浓度为0.002-0.003mol/mL，HBTU的浓度为0.5-1mg/mL，Lf-Mn²⁺-PEG的浓度为50-65mg/mL，DIPEA与Lf-Mn²⁺-PEG的摩尔比为20-30:1-2。

5. 根据权利要求1所述的适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针，其特征在于：所述步骤（5）中，Lf-Mn²⁺- PEG-CH1055的浓度为10-30mg/mL，乙醇的浓度为1-3mL/ml，戊二醛的浓度为15-35 μL/ml，滴定乙醇的速度为1-3min/mL，戊二醛的浓度为5-15%。

6.根据权利要求1所述的适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针，其特征在于：所述步骤（1）-（4）中，透析取分子量为大于10000的产物。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的适用于MRI/NIR-II的双模态肿瘤成像纳米探针的应用，其特征在于：将所述纳米探针应用制备脑胶质瘤、肝癌诊断试剂中。