[发明专利]一种用于生产羟基酪醇的工程菌在审
| 申请号： | 201910554741.7 | 申请日： | 2019-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN112126610A | 公开（公告）日： | 2020-12-25 |
| 发明（设计）人： | 赵华;张婷;宋田青;蒋发现 | 申请（专利权）人： | 枫杨生物研发（南京）有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京华睿卓成知识产权代理事务所(普通合伙) 11436 | 代理人： | 程淼 |
| 地址： | 211100 江苏省南京市江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 生产 羟基 工程 | ||
1.一种用于生产羟基酪醇的工程菌，其特征在于，所述工程菌表达将酪醇催化生成羟基酪醇的羟化酶以及将NAD+还原生成NADH的辅酶。
2.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述将酪醇催化生成羟基酪醇的羟化酶为酪氨酸酶或4-羟基苯乙酸3-单加氧酶。
3.如权利要求2所述的工程菌，其特征在于，所述将酪醇催化生成羟基酪醇的羟化酶为酪氨酸酶。
4.如权利要求3所述的工程菌，其特征在于，所述酪氨酸酶来源于嗜麦芽窄食单胞菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、内生芽胞杆菌、蔷薇双壳菌或青枯雷尔氏菌。
5.如权利要求2所述的工程菌，其特征在于，所述将酪醇催化生成羟基酪醇的羟化酶为4-羟基苯乙酸3-单加氧酶。
6.如权利要求5所述的工程菌，其特征在于，所述4-羟基苯乙酸3-单加氧酶来源于大肠杆菌或绿脓假单胞杆菌。
7.如权利要求6所述的工程菌，其特征在于，所述4-羟基苯乙酸3-单加氧酶来源于大肠杆菌。
8.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述将NAD+还原生成NADH的辅酶为甲酸脱氢酶、醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶或亚磷酸脱氢酶。
9.如权利要求8所述的工程菌，其特征在于，所述将NAD+还原生成NADH的辅酶为甲酸脱氢酶或醇脱氢酶。
10.如权利要求9所述的工程菌，其特征在于，所述将NAD+还原生成NADH的辅酶为甲酸脱氢酶。
11.如权利要求10所述的工程菌，其特征在于，所述甲酸脱氢酶来源于博伊丁假丝酵母、酿酒酵母或胞内分枝杆菌。
12.如权利要求11所述的工程菌，其特征在于，所述甲酸脱氢酶来源于胞内分枝杆菌。
13.如权利要求12所述的工程菌，其特征在于，所述编码来源于胞内分枝杆菌的甲酸脱氢酶的核苷酸序列为SEQ ID NO：10。
14.如权利要求9所述的工程菌，其特征在于，所述醇脱氢酶来源于短乳杆菌。
15.如权利要求14所述的工程菌，其特征在于，所述编码来源于短乳杆菌的醇脱氢酶的核苷酸序列为SEQ ID NO：11。
16.一种用于生产羟基酪醇的工程菌，其特征在于，所述工程菌是通过将pETDuet-1质粒转化到宿主大肠杆菌BL21(DE3)中得到的，所述pETDuet-1质粒装载将酪醇催化生成羟基酪醇的羟化酶基因以及将NAD+还原生成NADH的辅酶基因。
17.如权利要求16所述的工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌BL21(DE3)中分解酚类化合物的基因被敲除。
18.如权利要求17所述的工程菌，其特征在于，所述分解酚类化合物的基因为hpaD和/或hpaE。
19.如权利要求18所述的工程菌，其特征在于，所述分解酚类化合物的基因为HpaD和HpaE。
20.权利要求16-19中任一项所述的工程菌，其特征在于，所述将酪醇催化生成羟基酪醇的羟化酶为酪氨酸酶或4-羟基苯乙酸3-单加氧酶。
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