[发明专利]用于侦测及预防猪流行性下痢病毒感染的杆状病毒及组合物

说明书

本揭露提供用于侦测及预防猪流行性下痢病毒感染的杆状病毒及组合物，具体提供一种表达猪流行性下痢病毒S蛋白质、该S蛋白质的S1结构域、或其N蛋白质的杆状病毒，其是用于侦测及/或预防猪流行性下痢病毒感染。

相关申请案

本申请案主张于2018年6月25日提申的美国专利临时申请第62/689,427号案为优先权，其经由引用完整并入本案。

技术领域

本揭露是关于一种杆状病毒；特别是表达用于侦测及预防猪只于猪流行性下痢病毒感染的蛋白质的杆状病毒。

背景技术

猪流行性下痢(PED)是一种高度传染性的猪只疾病，其特征在于仔猪的急性水 性下痢和呕吐。PED于20世纪70年代首次在欧洲被发现，随后成为亚洲和欧洲零 星爆发的地方性疾病。自2010年底以来，中国出现了高毒力猪流行性下痢病毒 (PEDV)并袭击了新生仔猪。2013年，包括中国台湾在内的北美和东亚地区爆发了 高毒力的PED，导致养猪业遭受了巨大的经济损失。

市面上可取得的疫苗是PEDV RNA疫苗，且先前的结果显示该疫苗仅能使仔猪 的死亡率降低3％。第二个策略是使用PEDV的死毒疫苗，而6.6log¹⁰TCID50/mL效 价的低病毒产量明显限制了疫苗的广泛应用。领域中为开发可控制PED流行的疫苗 已经付出了很多努力。然而，目前仍无有效的商业化疫苗可用于控制全球的PED。 有效、安全且具有成本效益的用于控制PEDV的疫苗仍为领域中所迫切需要。

发明内容

本揭露的目的之一是提供侦测及预防猪流行性下痢病毒感染的有用工具。有用的工具可以是新的组合物(在一些具体实施例中也可以称为疫苗)，及/或其特定的活 性成分。

本揭露的另一个目的是提供可用于制备上述活性成分的工具。

为了实现上述目的，本揭露提供了一种表达猪流行性下痢病毒S蛋白质、该S 蛋白质的S1结构域、或猪流行性下痢病毒N蛋白质的杆状病毒。

本揭露亦提供一种医药组合物，其包含本揭露的杆状病毒以及医药上可接受的载体。

本揭露另提供一种表达卡匣，包含：启动子；第一多核苷酸，其编码SEQ ID NO:04；以及第二多核苷酸，其编码猪流行性下痢病毒S蛋白质、该S蛋白质的S1结构 域、或猪流行性下痢病毒N蛋白质。

本揭露又提供一种细胞，其包含本揭露的表达卡匣。

本揭露再提供一种于活体外评估猪流行性下痢病毒感染的方法，其包含：取得一待评估的个体的样本；使该样本与本揭露的杆状病毒或细胞接触。

附图说明

图1显示实验1的表达卡匣的组成及质粒pTriEx-S、pTriEx-S1、及pTriEx-N的 构建图。接续在GP64讯号蛋白质和6x His-标签之后的全长S蛋白质、S1结构域、 及N蛋白质基因由TriEx启动子驱动。pTriEx-S含有优化密码子的全长S基因。 pTriEx-S1及pTriEx-N具有与GP64跨膜结构域(TM-B)以及用于膜锚定的GP64细 胞质结构域(CTD-B)相接的优化密码子的编码为S1结构域多核苷酸及N蛋白质基 因。这些构建体亦插入由SV40-pag启动子驱动的mCherry荧光蛋白基因作为报导子。