[发明专利]一种ZFAS1基因的靶向抑制剂及其用途

说明书

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种ZFAS1基因的靶向抑制剂及其用途。一种ZFAS1基因的靶向抑制剂，该靶向抑制剂的基因序列为5'‑GTGCCCACTTCAAGAATGTCA‑3'。该抑制剂可与ZFAS1基因特异性结合，使ZFAS1基因沉默，从而抑制ZFAS1基因对血肿瘤屏障通透性的影响，安全有效的增加血肿瘤屏障的通透性，与传统化疗药物协同使用时能提高肿瘤组织中的传统化疗药物浓度。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种ZFAS1基因的靶向抑制剂及其用途。

背景技术

脑胶质瘤是中枢系统最常见的恶性肿瘤，占原发性脑肿瘤的50%-60%。目前治疗手段主要以手术为主，放化疗为辅助治疗。但是，由于胶质瘤具有侵袭性生长的生物学特征，并且胶质瘤级别越高，侵袭性越强，手术即使达到影像学和显微镜下全切，复发还是在所难免。目前主流的手术加术后同步化疗后统计显示其中位生存期仅为12个月，5年生存率不足13%。高级别神经胶质瘤预后更差，如多形性胶质母细胞瘤（Glioblastoma multiforme ,GBMs）的疗效仍然很差，生存中位数仍然不超过15个月。由于疗效差，越来越多的研究者致力于针对分子靶点研发新的治疗药物，包括肿瘤标志物、异常的信号途径、表观遗传学基因表达调控、肿瘤血管抑制剂和肿瘤免疫治疗等。在上述治疗策略的应用过程中，存在于脑毛细血管内皮细胞和肿瘤细胞之间的血肿瘤屏障（blood tumor barrier, BTB），极大地限制了治疗药物进入肿瘤组织，影响疗效。如何有效增加血肿瘤屏障的通透性，促进治疗药物选择性地进入肿瘤组织是亟待解决的关键问题。

长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA) 是一类长度超过200个核苷酸的非编码RNA转录本。研究发现，LncRNA能够调控胶质瘤的发生与发展。有研究表明，ZFAS1促进胃癌细胞的增殖和迁移，ZFAS1在非小细胞肺癌组织的异常表达，最近研究报道，ZFAS1在结直肠癌组织、卵巢癌组织和黑色素瘤组织中高表达，因而ZFAS1抑制剂仅限于在上述肿瘤组织中使用。目前尚未发现ZFAS1在胶质瘤微血管内皮中的表达并参与血肿瘤屏障通透性的调控。

RNA 干扰技术的原理是利用Dicer酶切割RNA分子，形成RNA沉默复合体，靶向结合目标RNA分子进而降解RNA分子的过程。本发明希望利用RNA干扰技术研制ZFAS1基因的抑制剂，在胶质瘤基因治疗领域发挥作用。

目前，ZFAS1影响胶质瘤血肿瘤屏障相关机制还未见报道，关于ZFAS1在胶质瘤基因治疗方面的应用目前还一片空白。因此，研制一种ZFAS1相关的药物成为目前亟待解决的问题。

发明内容

本发明经实验证明ZFAS1基因在胶质瘤在组织中高表达，抑制ZFAS1的表达能够开放血肿瘤屏障，增加血肿瘤屏障的通透性，提高肿瘤组织中的药物浓度，从而提高脑胶质瘤化疗疗效。

本发明的目的在于利用RNA干扰技术，设计并提供一种ZFAS1基因靶向抑制剂及其用途，该抑制剂可与ZFAS1基因特异性结合，使ZFAS1基因沉默，从而抑制ZFAS1基因对血肿瘤屏障通透性的影响，达到治疗胶质瘤的目的。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：本发明提供了一种ZFAS1基因的靶向抑制剂，该靶向抑制剂的基因序列为：

5'- GTGCCCACTTCAAGAATGTCA -3'（SEQ ID No.1）。

所述ZFAS1基因的靶向抑制剂能够抑制ZFAS1基因表达的shRNA序列，所述shRNA模板序列包括正义链和反义链，所述正义链和反义链分别为：

正义链:

5'-CACCGTGCCCACTTCAAGAATGTCATTCAAGAGATGACATTCTTGAAGTGGGCACTTTTTTG -3'（SEQ ID No.2）；

反义链：