[发明专利]植物生产口服杜拉鲁肽与纳豆激酶降糖胶囊的应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及杜拉鲁肽与纳豆激酶的融合蛋白及其应用。本发明利用植物例如生菜作为重组蛋白质生产的有效表达平台，利用简单以及高效的表达体系生产生物活性物质。随后将生产该活性物质的叶片冻干制成胶囊。此胶囊可以在常温保存而保持生物活性。利用Western Blot蛋白杂交法确定降糖活性蛋白成功表达。生物活性测试结果表明利用该平台技术生产的降糖胶囊显著降低了狗血液中的血糖浓度。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及植物生产口服杜拉鲁肽与纳豆激酶降糖胶囊的应用。

背景技术

糖尿病是以慢性高血糖为特征的常见病、多发病，是由体内胰岛素分泌或作用缺陷，或二者同时存在而引起的糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱。临床上主要有胰岛素依赖型(IDDM，I型)和非胰岛素依赖型(NIDDM，II型)两种类型。随着生活水平提高，无论在发达国家还是在发展中国家，糖尿病的发病率都在逐年上升。糖尿病作为一种严重的非传染性慢性疾病现已成为全世界各国密切关注的重大公共卫生问题之一，是全球范围内继心血管和肿瘤疾病之后的第三号杀手。从世界卫生组织公布的数据来看，1995年全球糖尿病患者仅3000万人左右，而到了1997年已增至1.35亿，到2030年将有3亿II型糖尿病患者，患者增幅最快的地区为亚洲和非洲。II型糖尿病患者的传统治疗模式一般是遵循饮食控制、口服抗糖尿病药物和外源性胰岛素的阶梯式治疗。但目前糖尿病治疗领域仍存在着诸多尚待解决的重要问题，而且还存在一些副作用和限制。

胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是由肠道内分泌细胞分泌的肠降血糖素，是胰高血糖素原基因翻译后加工产物，在体内有多种存在形式。它具有以下生理作用：以葡萄糖依赖方式作用于胰岛β细胞，促进胰岛素基因的转录，增加胰岛素的生物合成和分泌；刺激β细胞的增殖和分化，抑制β细胞凋亡，从而增加胰岛β细胞数量，抑制胰高血糖素的分泌，抑制食欲及摄食，延缓胃内容物排空等。这些功能都有利于降低餐后血糖并使血糖维持在恒定水平。

尽管天然GLP-1在治疗糖尿病上有诸多优点，但它的体内半衰期仅为2分钟左右，限制了其在临床上的直接应用。而将天然的GLP-1中的某些氨基酸突变后可以在保证其活性的条件下延长它的半衰期，做到每周一次给药就可以保持正常的血糖水平。目前已经上市的相关产品有Liraglutide、Dulaglutide、Semaglutide等。由于多肽类药物本身的性质以及人体对其产生的各种屏障，其常规给药途经一直以注射为主。长期频繁注射给药给病患造成了身体和精神上的双重痛苦，因此，提供一种治疗糖尿病的口服制剂具有重要的现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供植物生产口服降糖胶囊的应用。本发明利用植物尤其是生菜作为重组蛋白生产的高效平台技术，表达了杜拉鲁肽(Dulaglutide)与纳豆激酶的融合蛋白。并且制成口服降糖胶囊。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了杜拉鲁肽(Dulaglutide)与纳豆激酶的融合蛋白，其具有：

(Ⅰ)、如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；或

(II)、如(Ⅰ)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列，且与(Ⅰ)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；或

(III)、与(Ⅰ)或(II)所述序列至少有80％同源性的氨基酸序列。

在本发明的一些具体实施方案中，所述多个为2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个或16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个或32个。

本发明还提供了编码所述融合蛋白的核苷酸，具有

(Ⅰ)、如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；或