[发明专利]一种用于诊断弱精子症的生物标记物

说明书

本发明提供了一种用于诊断弱精子症的生物标记物，属于生物医学和分子诊断技术领域。该生物标记物为TDRG1，Uniprot序列号为Q3Y452。TDRG1在弱精子症的精子中表达水平显著下调，可以应用于制备具有诊断由弱精子症导致的不育症的药物。

技术领域

本发明属于生物医学和分子诊断技术领域，具体涉及一种用于诊断弱精子症的生物标记物。

背景技术

弱精子症(asthenospermia)指精液参数中前向运动精子比率小于32％的病症，是男性不育的主要病因之一。引起精子活力低下的原因很多，包括外部环境、自身缺陷和遗传等因素，但弱精子症具体发病机制不明，严重阻碍了弱精子症临床诊断和治疗的进展。已有文献报道睾丸特异性蛋白含量降低与弱精子症的发病机制有关。迄今为止，诊断弱精子症的生物标记物尚未开发和在临床上使用，因此，迫切需要更深入地研究弱精子症的致病机理，找到新的弱精子症相关蛋白质，促进对弱精子症发病机制的认识，从分子水平找到男性不育症的病因，真正做到诊断、治疗和预防的三位一体，为男性不育患者提供精准化个体化治疗。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于诊断弱精子症的生物标记物，该标记物和弱精子症具有很好的相关性，可以应用于制备由弱精子症导致的不育症的诊断试剂。

在弱精子症导致的不育症中，TDRG1表达水平显著下调，因而，可以通过检测TDRG1表达水平，来诊断患者是否患有不育症。

一种用于诊断弱精子症的生物标记物，该生物标记物为蛋白质，中文名为睾丸发育相关蛋白1，英文全称Testis development-related protein 1，缩写TDRG1，Uniprot序列号为Q3Y452，含有100个氨基酸，预测分子量为11KDa，具体序列号如下所示：MKRREAVCAHRHFLGTGKPPHPLGRSIPVEPCPGLPAFAEVDLLSLLVPIKISSTPPSGSRLDPQIASSAFPGLGSLGGQDSSGSLVQRA SCELESPYEL。

本发明的另一目的是：提供一种检测上述TDRG1表达水平的产品在制备由弱精子症导致的不育症的诊断物上的应用。

本发明提供的生物标记物将为开发弱精子症诊断试剂盒提供可靠分子靶标，有助于弱精子症的分子诊断，经过试验证明，弱精子症患者的精子中的TDRG1表达水平显著下调，因而，采用TDRG1对于弱精症的诊断具有价值。

附图说明

图1为正常人(Norm)精子中TDRG1含量(Relative gray value)。

图2弱精子症(Asth)精子中TDRG1含量(Relative gray value)。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明作进一步地说明。

上述TDRG1作为弱精子症诊断剂时，其使用方法包括如下步骤：

(1)提取精子总蛋白；

(2)将精子总蛋白采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离；

(3)将精子总蛋白从聚丙烯酰胺凝胶上转移到聚偏氟乙烯膜上；

(4)带有精子蛋白的聚偏氟乙烯膜用脱脂奶粉封闭后，分别用TDRG1和β-肌动蛋白(β-ACTIN，内参)单克隆抗体进行孵育，再用羊抗鼠二抗孵育；

(5)孵育膜用增强化学发光法显色，用化学发光凝胶成像仪拍照；

(6)图片用Image J分析，分别读取TDRG1和ACTIN条带灰度值Int(TDRG1)和Int(ACTIN)，计算每个样本的Int(TDRG1)/Int(ACTIN)；

(7)Int(TDRG1)/Int(ACTIN)值小于0.32为TDRG1含量下降的弱精子症。