[发明专利]一种低敏性ω-5-醇溶蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种低敏性ω-5-醇溶蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将纯化的ω-5-醇溶蛋白溶解在三氟甲磺酸中，冰上孵育，期间不时震荡，以获得第一混合液；

(2)向所述第一混合液中加入指示剂，并且逐滴加入吡啶溶液，边滴边震荡至所述第一混合液的颜色呈蓝色，以获得第二混合液，所述指示剂为含1％溴酚蓝的无水乙醇溶液；

(3)将所述第二混合液通过凝胶过滤层析进行脱盐处理，收集洗脱液，冷冻干燥，以获得所述低敏性ω-5-醇溶蛋白。

2.如权利要求1所述的低敏性ω-5-醇溶蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，冰上孵育的时间为15～30min。

3.如权利要求1所述的低敏性ω-5-醇溶蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，纯化的ω-5-醇溶蛋白通过以下步骤制得：

取小麦原料粉碎，以获得小麦粉；

在所述小麦粉中加入超纯水超声震荡15min，离心，以获得第一沉淀；

向所述第一沉淀中加入1mol/L的氯化钠超声震荡10～15min，离心，以获得第二沉淀；

向所述第二沉淀中加入60％～80％浓度的乙醇溶液超声震荡15min，离心，收集上清液；

将所述上清液氮吹后，用10％乙腈溶液复溶，再通过AKTA pure 25纯化，冷冻干燥，以获得所述纯化的ω-5-醇溶蛋白。

4.如权利要求1所述的低敏性ω-5-醇溶蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，所述吡啶溶液于-20℃下预冷，且所述吡啶溶液的用量为2～3倍的三氟甲磺酸的体积。

5.如权利要求1所述的低敏性ω-5-醇溶蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，所述凝胶过滤层析采用HiTrap Desalting 5mL的层析柱，并用10％乙腈溶液作为洗脱液进行洗脱。

6.一种低敏性ω-5-醇溶蛋白，其特征在于，所述低敏性ω-5-醇溶蛋白采用如权利要求1～5中任一项所述的低敏性ω-5-醇溶蛋白的制备方法制得。

7.一种如权利要求6所述的低敏性ω-5-醇溶蛋白的应用，其特征在于，以所述低敏性ω-5-醇溶蛋白作为活性成分之一或唯一活性成分用于制备抑制ω-5-醇溶蛋白与IgE结合的药物。