[发明专利]一种牛大力的培养方法有效
| 申请号： | 201910545000.2 | 申请日： | 2019-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN110521593A | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 周国权;郑彬江;郑彬旭;罗志超 | 申请（专利权）人： | 佛山市粤山生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 11350 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 赵蕊红<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 528000 广东省佛山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 愈伤组织 牛大力 细胞分裂 邻羟基苯甲酸甲酯 诱导培养 幼苗根部 增殖效率 培养基 培养物 提取液 有效地 褐变 幼苗 浸泡 生长 死亡 | ||
1.一种牛大力的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：取萌发14天的牛大力幼苗茎部，剥除表皮后用蒸馏水洗涤30分钟，随后将其浸入浓度为8％的苯扎氯铵溶液中2至6秒，接着在浓度为60％的酒精溶液中浸泡1至3秒，再在浓度为10％的次氯酸钠溶液中浸泡30至40分钟，将经过浸泡处理后的幼苗茎部用切刀划开创口，然后将创口朝下放入第一培养基中进行愈伤组织培养，所述第一培养基含有MS盐、0.5-1 mg/L邻羟基苯甲酸甲酯、0.3 mg/LBAP、1 mg/L NAA、20-30g/L蔗糖和5-10g/L琼脂，第一培养基的pH为5.8，在第一培养基中培养70天后，将其接种到第二培养基上，第二培养基含有MS盐、维生素、0.3 mg/L BAP、1 mg/LNAA、20-30g/L蔗糖和3-6g/L琼脂，第二培养基的pH为5.8，在第二培养基中培养30-60天后，再将愈伤组织转移到HSM培养基中再生，萌芽后，转移到无激素MS培养基，然后在7-10天后移栽入土壤。
2.如权利要求1所述的牛大力的培养方法，其特征在于，所述第一培养基中还含有牛大力幼苗根部的提取液，所述提取液的提取方法为：将牛大力幼苗的根部切碎，并放入到甲醇溶液中过夜提取，然后减压浓缩以除去甲醇，再加入醋酸丁酯并搅拌分离成水层和第一醋酸丁酯层，取上述醋酸丁酯层加入到5％碳酸氢钠溶液中，继续搅拌分离为水层和第二醋酸丁酯层，取该第二醋酸丁酯层即得到提取液。
3.如权利要求2所述的牛大力的培养方法，其特征在于，述提取液的添加量为0.5-2ml/L。
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