[发明专利]一种推算金腰属植物基因组大小的方法

权利要求书

1.一种推算金腰属植物基因组大小的方法，其特征在于，所述方法的步骤为：

(1).获取叶片：选取生长茂盛的金腰属植物，取其新鲜叶片1平方厘米左右，然后用蒸馏水清洗干净叶片表面附着的泥土，后续实验操作过程需低温操作在冰上进行；

(2).预处理：将洗干净的叶片放入预冷的塑料培养皿中，加入0.5ml左右预冷的改良Hepes解离液，用锋利的刀片一次性快速切碎，整个过程，材料须浸没在解离液里，以便更好的游离细胞核；加入0.5ml左右预冷的改良Hepes解离液，游离细胞核，所述改良Hepes解离液为10mmol/L MgSO4·7H2O，50mmol/L KCl，5mmol/LpH 8的 Hepes，10mmol/L DTT，0.25％Triton X-100，0.2mmol/L Tris·HCl；

(3).细胞核悬浮液制备：使用滤膜将悬浮液过滤至1.5ml的离心管中，加入1/10体积的DAPI溶液，避光染色30分钟，所述滤膜为400目，所述DAPI溶液浓度为：10μg/ml；

(4).参照样本的选择：选取大豆新鲜叶片组织，与金腰属植物做相同处理，制备成细胞核悬浮液，备用；

(5).镜检观察：使用OLYMPUSBX51显微镜，紫外光源，20x镜下观察，找到荧光染色的白点，即为染色后的细胞核，然后用OLYMPUSDP73摄像头拍照，保存照片；

(6).上机检测：将制备的细胞核悬浮液移至上样管，上机检测，所述上机检测的顺序为：先检测大豆细胞核悬浮液，再检测金腰属植物的细胞核悬浮液，所述大豆基因组大小为：950M；

(7).样本基因组大小预测：通过比对参照样本与目标样本的峰值图，推算出金腰属植物的基因组大小；

所述金腰属植物为大叶金腰。

2.权利要求1所述推算金腰属植物基因组大小的方法在推算金腰属植物基因组大小中的用途。