[发明专利]一种NK细胞和CD20+靶点抗体的组合物及在淋巴瘤上应用

说明书

本发明公开了一种NK细胞和CD20+靶点抗体的组合物及在淋巴瘤上应用，组合物包括NK细胞及以CD20+为靶点的单抗和/或双特异性抗体及稳定剂，NK细胞同CD20+靶点单抗和/或双特异性抗体混合后的组合物对REC‑1人淋巴瘤细胞杀伤作用强，且可以抑制REC‑1人淋巴瘤细胞转移及肿瘤病灶的形成；且组合物体系稳定；组合物对CD20+靶点抗体产生耐药或者不敏感的患者有较好的效果，可以为临床治疗方案提供参考。

技术领域：

本发明涉及一种NK细胞和CD20+靶点抗体的组合物及在淋巴瘤上应用，组合物包括免疫治疗细胞和抗体，具体涉及NK细胞及CD20+为靶点的单抗和/或双特异性抗体，使用该组合物在癌细胞REC-1人淋巴瘤细胞上的应用。

背景技术：

细胞免疫治疗是目前最具有前景的肿瘤治疗方式之一，通过体外扩增或改造后回输到病人体内达到杀伤肿瘤细胞的目的或者通过活化机体免疫系统，增强肿瘤患者自身免疫功能从而抵抗肿瘤或其他疾病。目前，NK细胞免疫治疗受到越来越多的重视。NK细胞占人外周血淋巴细胞的5-15％，一般定义其表型为CD3-CD56+，NK细胞又可以进一步细分为两个主要的亚群：具有免疫调节功能的CD56highCD16-细胞和具有细胞毒活性的CD56dimCD16+细胞。NK细胞在抗病毒感染和抗肿瘤的早期免疫反应中发挥着重要的免疫监视功能，NK细胞不需要识别肿瘤特异性抗原，便可直接、快速的发挥细胞毒活性。特别重要的是NK细胞能够有效地清除机体内的肿瘤干细胞样细胞，抑制肿瘤的生长和转移。

NK细胞在抗病毒感染和抗肿瘤的早期免疫反应中发挥着重要的免疫监视功能，NK细胞不需要识别肿瘤特异性抗原，便可直接、快速的发挥细胞毒活性。特别重要的是NK细胞能够有效地清除机体内的肿瘤干细胞样细胞，抑制肿瘤的生长和转移。最新的研究表明，阻断NK细胞表面的免疫检测点受体TIGIT，可以有效的阻止NK细胞的耗竭，促进NK细胞依赖的肿瘤免疫，抑制多种小鼠恶性肿瘤的生长。因此，NK细胞在机体免疫系统抵抗肿瘤的反应中发挥必不可少的作用，机体NK细胞功能紊乱，是肿瘤发生、发展的可能原因之一。自体或者同种异体NK细胞已经用于治疗恶性淋巴瘤、难治性非霍奇金淋巴瘤、复发性/难治性急性白血病、急性髓性白血病、儿童复发/难治性神经母细胞瘤、晚期胃癌、结直肠癌、结直肠癌/胰腺癌肝转移以及多种复发性、转移性实体瘤。临床显示出良好的耐受性和一定的治疗效果。

B淋巴细胞抗原CD20+是在淋巴B细胞表面表达的糖基化磷蛋白，在人体B细胞的发育分化周期中，从前B细胞到成熟B细胞阶段CD20+的抗原表面丰度逐渐增加，但在B细胞发育的最初和最后阶段CD20+不表达。CD20+在B细胞淋巴瘤，白血病，B细胞慢性白血病和黑色素瘤肿瘤干细胞中均有表达。CD20+在正常生理组织和肿瘤组织的表达特征使CD20+可以作为一个很好的B细胞疾病相关的靶点。

临床上治疗非霍奇金淋巴瘤传统单独使用CHOP方案或者联合依托泊苷，临床缓解率可大45-55％。科学家研究发现大部分非霍奇金淋巴瘤来源于B细胞，其中90％表现为CD20+，所以治疗大部分非霍奇金淋巴瘤的有效靶点为CD20+，随着利妥昔单抗的应用，临床上大部分患者病情得到缓解。但仍有部分CD20+的患者对利妥昔单抗产生耐药，还有一部分出现对利妥昔单抗不敏感，因此针对目前临床CD20+的产生耐药或者不敏感的患者需要提供更有效的治疗方法或者治疗药物。

发明内容

针对上述所述问题，本发明提出了一种细胞组合物，组合物具体包括NK细胞及以CD20+为靶点的单抗和/或双特异性抗体，该组合物在癌细胞REC-1人淋巴瘤细胞上的应用。且组合物中的NK细胞通过活化扩增培养，扩增出具有数量大、扩增倍数高、细胞毒性强等特点的NK细胞，扩增培养后的NK细胞同以CD20+为靶点的单抗和/或双特异性抗体复合形成一种细胞组合物，其具有非常好的临床应用价值。

为了实现上述目的，本发明采用以下的技术方案：

所述组合物包括：NK细胞及以CD20+为靶点的单抗和/或双特异性抗体以及稳定剂。