[发明专利]UPLC-MS法鉴定桂枝芍药知母汤中主要有效成分

权利要求书

1.一种鉴定桂枝芍药知母汤中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的方法为超高效液相高分辨飞行时间质谱法UPLC-Q-tof-MS，具体色谱条件与质谱条件如下：

a.色谱条件

色谱柱：BEH C18，2.1*100mm，1.7um，Waters；流动相：A为乙腈，B为0.1％甲酸水；柱温：45℃；流速：0.40mL/min；进样体积：1uL；进行梯度洗脱；

b.质谱条件

电离模式：电喷雾电离，正离子模式/负离子模式；毛细管电压：2.0kv；锥孔电压：40V；离子源温度：120℃；脱溶剂温度：400℃；脱溶剂气流速度：800L/hr；扫描模式：MSe；碰撞能范围：25-45ev。

2.根据权利要求1所述的一种鉴定桂枝芍药知母汤中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的方法中色谱条件的梯度洗脱程序为：

3.根据权利要求1所述的一种鉴定桂枝芍药知母汤中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的方法筛选并鉴定出桂枝芍药知母汤中28个化合物，分别为：苹果酸、柠檬酸、麻黄碱、没食子酸、伪麻黄碱、3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid、新芒果苷、儿茶素或表儿茶素、芍药内酯苷、芒果苷、芍药苷、升麻素苷、异佛莱心苷、芹糖甘草苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、知母皂苷E1、知母皂苷N、知母皂苷B2、知母皂苷D、异甘草苷、甘草素、知母皂苷C、22β-acetoxyglycyrrhiz in、Licoricesaponin E2、知母皂苷I、Licoricesaponin G2、甘草酸。

4.根据权利要求1所述的一种鉴定桂枝芍药知母汤中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的桂枝芍药知母汤的样品制备方法为：

①称取桂枝、白芍、甘草、麻黄、知母、生姜、白术、防风、炮附片饮片，加纯净水浸泡，武火煮沸，文火微沸至400mL，过滤，冷冻干燥，制得桂枝芍药知母汤物质基准；

②取桂枝芍药知母汤物质基准冻干粉加水溶解后，加乙醇，放置24h后，取上清液浓缩至无醇味，制得桂枝芍药知母汤冻干粉。

5.根据权利要求1所述的一种鉴定桂枝芍药知母汤中主要有效成分的方法，其特征在于，所述的桂枝芍药知母汤的样品制备方法为：

①称取桂枝、白芍、甘草、麻黄、知母、生姜、白术、防风、炮附片饮片，加纯净水1400mL，浸泡30min，武火煮沸，文火微沸至400mL，200目纱布双层过滤，冷冻干燥，制得桂枝芍药知母汤物质基准；

②取桂枝芍药知母汤物质基准冻干粉加水溶解后，95％乙醇至75％，放置24h后，取上清液浓缩至无醇味，制得桂枝芍药知母汤冻干粉。