[发明专利]基于二氧化锰纳米片的比率型荧光传感器检测有机磷农药

权利要求书

1.基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括以下步骤：将有机磷农药与乙酰胆碱酯酶混合反应得到混合溶液，然后在混合溶液中加入氯化乙酰胆碱溶液和PBS缓冲溶液反应得到溶液，在溶液中加入二氧化锰纳米片溶液和PB缓冲溶液室温下反应得到混合物，最后将Scopoletin和Amplex Red加入上述混合物中在黑暗环境中反应，分别记录溶液中Scopoletin和Amplex Red的荧光光谱的荧光值，通过两者荧光值的比值得出有机磷农药的浓度。

2.根据权利要求1所述基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述机磷农药与乙酰胆碱酯酶的体积比0.2~0.25。

3.根据权利要求1所述基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述乙酰胆碱酯酶的浓度为12.5 mU/mL~0.75U/mL，所述氯化乙酰胆碱的浓度为1 mM -10 mM。

4.根据权利要求1所述的基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述PBS缓冲溶液为：137 mM NaCl、10 mM NaH₂PO₄、2.7 mMKCl、2 mM KH₂PO₄，pH 6～9。

5.根据权利要求1所述基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述二氧化锰纳米片溶液的合成步骤如下：

1）过氧化氢与四甲基氢氧化铵溶液混合后在15秒~30秒内快速加入MnCl₂溶液，悬浊液在室温下剧烈搅拌，将得到的溶液在离心机离心，然后用水洗和醇洗，干燥，得到块状二氧化锰；

2）称取块状二氧化锰溶于超纯水中并超声，使二氧化锰完全分散，将分散液在离心机离心，保留上清液。

6.根据权利要求5所述的基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述过氧化氢浓度为2 wt %~3 wt %，四甲基氢氧化铵浓度为1.1 M ~1.2 M，氯化锰浓度为0.2 M~ 0.3 M。

7.根据权利要求1所述的基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述二氧化锰纳米片溶液的浓度为0.1 mg/mL-1.5 mg/mL。

8.根据权利要求1所述的基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述PB缓冲溶液为25 mM NaH₂PO₄，pH 5~5.5。

9.根据权利要求1所述的基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述分析方法具体包括以下步骤：将含有乙酰胆碱酯酶和有机磷农药溶液混合后在37℃温育20~30分钟；接下来，将氯化乙酰胆碱溶液和PBS缓冲溶液再加入上述溶液中在35 ℃~ 40 ℃下反应25~30分钟；然后，加入MnO₂纳米片溶液和PB缓冲溶液，并在室温下温育30分钟；最后，将Scopoletin和Amplex Red加入上述混合物中，并在黑暗环境中反应30~40分钟，在室温下记录荧光光谱，通过荧光强度得出有机磷农药的浓度。

10.根据权利要求7所述的基于二氧化锰纳米片响应的比率型荧光传感器检测有机磷农药的分析方法，其特征在于，所述Scopoletin浓度为 45~50 uM；所述Amplex Red浓度为45~50 uM。