[发明专利]一种具有抑制肠癌细胞增殖作用的枳实多酚及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种具有抑制肠癌细胞增殖作用的枳实多酚及其制备方法与应用。该方法包括：将枳实粉碎后，得到枳实粉末，将枳实粉末加入水中，混匀，加热进行提取处理，得到提取液；将提取液离心，取上清液，过滤取滤液，浓缩，干燥得到冻干粉；将冻干粉溶于水中，配制混合液，将大孔树脂加入混合液中，进行吸附处理，抽滤，将吸附后大孔树脂加入乙醇溶液中，置于摇床进行解吸处理，得到解吸液；将解吸液抽滤，取滤液，浓缩，冻干得到所述具有抑制肠癌细胞增殖作用的枳实多酚。本发明提供的枳实提取物具有抑制人结肠癌细胞RKO增殖的活性，可用于制备治疗结肠癌药物的开发，为中药配伍应用于临床抗肿瘤药物研究提供实验基础和科学依据。

技术领域

本发明涉及枳实提取技术领域，具体涉及一种具有抑制肠癌细胞增殖作用的枳实多酚及其制备方法与应用。

背景技术

枳实是芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种或甜橙C.sinensisOsbeck的干燥幼果。《名医别录》有关枳实记载：“除胸胁痰癖，逐停水，破结石，消胀满，心下急痞痛……胁风痛，安胃气，止溏泄”。《神农本草经》谓其：“除寒热结，止痢……”。枳实，其味苦、辛、酸，性微寒，是一种经典理气药，归脾、胃经，具有破气消积、化痰散痞的功效，即枳实具有调畅全身气机，消积滞除痞满的作用，临床广泛应用于治疗积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重、大便不通、大便溏薄等症。

药理研究显示，枳实的主要有效成分为黄酮类、挥发油以及少量的生物碱类化合物。柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷等黄酮类最能体现枳实特征，是枳实理气、行滞、平喘、抗炎、抗氧化以及抗过敏的重要活性成分，具有促胃动力的作用，可改善大鼠的胃排空和小肠推进。生物碱类为枳实中强心升压的主要成分，主要有辛弗林、N-甲基酪胺、乙酰去甲辛弗林、去甲肾上腺素、喹诺啉、那可汀等。枳实始载于《神农本草经》，列为中品，其味苦、辛，微寒，归脾、胃、大肠经，具有破气消积、化痰除痞之功效。

枳实治积冷利脱肛：枳实一枚。石上磨令滑泽，钻安柄，蜜涂、炙令暖熨之，冷更易之，取缩入止。(《干金方》)；枳实治产后腹痛，烦满不得卧：枳实(烧令黑，匆太过)、芍药等分。杵为散。服方寸匕，日三服。并主痈脓，以麦粥下之。(《金匮要略》)枳实芍药散)；治大便不通：枳实、皂荚等分。(《世医得效方》)。

大肠癌(colorectal cancer，CRC)是最常见的恶性肿瘤之一，发病率居第3位，是主要的癌症相关死亡原因。根据世界卫生组织发布的消息，2015年全球因大肠癌导致死亡的人数为77.4万人；在我国，大肠癌的发病率呈明显的上升趋势，死亡率位居恶性肿瘤死因的第2位。

研究表明枳实对胃肠具有一定的保护作用，枳实、枳壳的水煎剂、酊剂及流浸膏对小鼠、家兔的离体肠管及家兔的在体肠管均有抑制作用。水煎液使胃、肠瘘狗的胃肠收缩节律有力，呈兴奋作用。枳实提取物对乙酰胆碱和组胺所致肠管收缩有明显的拮抗作用。

现有枳实多酚制备工艺方法陈旧，一般由枳实药材经过简单提取后所得粗提物制备而成，有效成分含量低；表明本发明采用新方法对枳实多酚进行提取、分离，通过大孔树脂富集提取物中的有效成分，提高了枳实原料的有效利用率。

发明内容

为了克服现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种具有抑制肠癌细胞增殖作用的枳实多酚及其制备方法与应用。

本发明提供枳实提取物在制备抑制肠癌细胞增殖中药提取物中的应用，能够从枳实原料中提取、富集有效抑制肠癌细胞增殖的活性成分，实现枳实提取物的新用途问题。

本发明的目的至少通过如下技术方案之一实现。

本发明提供的一种具有抑制肠癌细胞增殖作用的枳实多酚的制备方法，包括如下步骤：

(1)将干燥的药材枳实粉碎后过筛，得到枳实粉末，将所述枳实粉末加水浸提，混合均匀，加热进行提取处理，得到提取液；