[发明专利]4-磺化杯[n]芳烃/CTAB复配体系在提高多酚氧化酶活性中的应用

说明书

本发明公开了4‑磺化杯[n]芳烃/CTAB复配体系在提高菠萝中多酚氧化酶活性中的应用。本发明通过将抑制酶活性的4‑磺化杯[n]芳烃与提高酶活性的表面活性剂CTAB进行复配，形成超两亲分子，与菠萝提取液中多酚氧化酶发生相互作用。本发明首次通过4‑磺化杯[n]芳烃/CTAB复配体系实现对菠萝中多酚氧化酶活性的调控，将4‑磺化杯[n]芳烃/CTAB复配，降低4‑磺化杯[n]芳烃对菠萝中多酚氧化酶活性的抑制作用，并且在最适条件下，能够将菠萝中多酚氧化酶的酶活性显著提高至419％。

技术领域

本发明属于生物酶技术领域，涉及4-磺化杯[n]芳烃/十六烷基三甲基溴化铵复配体系在提高多酚氧化酶活性中的应用，具体涉及4-磺化杯[n]芳烃/十六烷基三甲基溴化铵复配体系在提高菠萝中多酚氧化酶活性中的应用。

背景技术

在许多植物体中存在很多不同种类的蛋白酶，其中多酚氧化酶(PPO)是自然界中分布极广的一种金属蛋白酶，在苹果、菠萝、蘑菇等植物中广泛存在。它在食品、化工、医药等许多领域均有着广泛的应用，但由于应用过程中常使用一些添加剂，导致多酚氧化酶的酶活性降低甚至失活。如何在添加剂的存在下，保持多酚氧化酶的活性是其工业应用过程中需要解决的问题。

杯芳烃具有与环糊精和冠醚相似的性质，被誉为第三代超分子，能够与生物分子相互作用，在蛋白质识别、蛋白质组装方面的应用广泛。中国专利申请201810041508.4公开了杯芳烃衍生物在调控菠萝蛋白酶和多酚氧化酶活性中的应用。其中4-磺化杯[n]芳烃对菠萝果汁中的多酚氧化酶的活性起到抑制作用。

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)属于阳离子表面活性剂，具有良好的表面活性、稳定性、杀菌性及生物降解性，并且耐热、耐光，广泛用于润湿、杀菌、抗静电、去污、增溶等方面。中国专利申请201610175997.3报道了CTAB可以提高苹果粗提液中多酚氧化酶的活性，当CTAB浓度为0.3mM，pH为7时，多酚氧化酶活性可提高75％左右。

发明内容

本发明的目的在于提供4-磺化杯[n]芳烃(SC[n])/CTAB复配体系在提高菠萝中多酚氧化酶活性中的应用。本发明将SC[n]与CTAB进行复配，形成超两亲分子，显著降低了SC[n]对菠萝中多酚氧化酶活性的抑制作用。在SC[n]的存在下，通过加入CTAB，仍能大幅度提高菠萝中多酚氧化酶的酶活性。

本发明中，所述的4-磺化杯[n]芳烃结构式如式I所示：

n＝4，6或8，即为4-磺化杯[4]芳烃(SC[4])，4-磺化杯[6]芳烃(SC[6])或4-磺化杯[8]芳烃(SC[8])。

本发明中，所述的SC[n]/CTAB复配体系中，pH调节为菠萝中多酚氧化酶的最适pH，即pH＝6.0～8.0。

本发明中，所述的SC[n]/CTAB复配体系中，温度调节为菠萝中多酚氧化酶的最适温度，即温度为25℃～45℃。

本发明中，所述的SC[n]/CTAB复配体系中，所述的SC[n]与CTAB的质量比为1:5～2:1。

在本发明具体实施例中，所述的SC[n]/CTAB复配体系中，SC[4]与CTAB的质量比为1:5～3:5。

在本发明具体实施例中，所述的SC[n]/CTAB复配体系中，SC[6]与CTAB的质量比为1:5～1:1。

在本发明具体实施例中，所述的SC[n]/CTAB复配体系中，SC[8]与CTAB的质量比为1:5～2:1，优选为1:1。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：