[发明专利]Erbin在制备结直肠癌肺转移的检测和治疗产品中的应用

说明书

本发明公开了Erbin在制备结直肠癌肺转移的检测和治疗产品中的应用。本发明阐明了Erbin在结直肠癌肺转移中调控肿瘤免疫微环境的作用，明确Erbin调控IgA+B细胞介导CD8+T细胞在结直肠癌肺转移中的作用及其机制，提供Erbin的拮抗物质在制备防治结直肠癌肺转移的药物中的应用。并证明B细胞中缺失Erbin基因可以调控IgA+CD138+细胞，通过在结直肠癌肺转移的B细胞中缺失Erbin转基因动物肺组织中检测到IgA+CD138+细胞显著高于对照组，且检测到该转基因小鼠的血清中IgA蛋白显著高于对照组中的。且发现该细胞低表达PD1。且该IgA+CD138+细胞能通过CD8+T细胞的细胞杀伤效应来杀伤结直肠癌细胞，进而抑制结直肠癌肺转移。

技术领域

本发明涉及Erbin在制备结直肠癌肺转移的检测和治疗产品中的应用，属于生物医药技术领域。

背景技术

结直肠癌是全世界排名前三的恶性肿瘤，尽管现在诊断和治疗技术有了很大的提升，远端转移的结直肠癌病人预后仍然很差。近些年综合治疗在肝转移灶领域的成功应用明显改善了肝转移患者的生存。

与结直肠癌肝转移相比，对于结直肠癌肺转移的关注程度、综合治疗理念及相关的临床和基础研究都相对匮乏。另外，我国的直肠癌比例近50％，直肠癌患者更容易发生肺转移，北京大学肿瘤医院1996年至2017年的回顾性资料显示，我国肺转移病例占所有转移性结直肠癌的32.9％，而初发肺转移的患者达24.5％。因而，结直肠癌肺转移的诊断和治疗及其相关临床和基础研究是一个亟需重视的领域。

肺的微环境是高度动态的，常常会受到各种因素的影响。目前大多研究围绕探讨先天性免疫系统如何快速清除病原，保持肺部内稳态。更多了解肺脏本身肿瘤微环境能帮助我们发现新的靶点，增强治疗的有效性，更好得找到靶向治疗及治疗时产生的细胞毒素的平衡点。

Erbin属于富含亮氨酸重复序列及PDZ结构域蛋白(leucine rich repeat andPDZ containing protein,LAP)家族的成员。它是一个重要的接头蛋白，该家族成员特征为N端有16个亮氨酸(LRRs)的重复序列，C端有1-4个PSD95-Dlg-Zol(PDZ)功能域。最早因为它能直接结合ErbB2而被命名为Erbb2-interacting-protein(Erbb2ip)。近几年来，我们课题组围绕着Erbin对肿瘤细胞本身的影响进行了系列工作。我们发现，Erbin能够直接和ERa作用，介导其泛素化降解，从而促进肝癌发生。在结直肠癌，我们发现Erbin可以通过与c-Cbl相互作用抑制EGFR泛素化降解，从而促进结直肠癌的发生。此外，梅林教授团队报道Erbin可通过调控ErbB2促进乳腺癌细胞的增殖。

肿瘤的侵袭转移不单与肿瘤细胞自身的改变有关还与其赖以生存的环境是分不开的，例如淋巴细胞的表型和功能特征，它们与肿瘤细胞或肿瘤间质的相互作用，浸润入肿瘤的淋巴细胞的细微差异都可能导致杀灭肿瘤细胞或促进它们生长两种不同的结局。大量肿瘤样本中的基因组和转录组数据已经被用于研究肿瘤微环境(tumormicroenvironment，TME)，并用于评价浸润在肿瘤中的免疫细胞亚群免疫基因的表达。通过分析T细胞受体(TCR)，B细胞受体(BCR)基因的表达可让我们更多的了解免疫微环境的特征。但是，Erbin在肿瘤免疫微环境中的作用并不清楚。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明应用条件性敲除Erbin小鼠，完全敲除Erbin小鼠，结直肠癌细胞系，及其临床结直肠癌肺/肝转移标本从整体动物模型，细胞模型及其临床标本阐明Erbin在结直肠癌肺转移中调控肿瘤免疫微环境的作用，明确Erbin调控IgA+B细胞介导CD8+T细胞在结直肠癌肺转移中的作用及其机制。

本发明的第一个目的是提供Erbin的拮抗物质在制备防治结直肠癌肺转移的药物中的应用，所述的药物降低B细胞中Erbin的表达。

进一步地，所述的拮抗物质为抗体、siRNA、shRNA或慢病毒包裹的序列。