[发明专利]一种检测抗坏血酸浓度的方法

说明书

本发明公开了一种检测抗坏血酸浓度的方法。包括：1)标准曲线的绘制：用至少5组不同浓度的抗坏血酸标准溶液分别与五氧化二钒纳米颗粒进行反应，得到不同的混合液，并利用紫外可见光谱分别测其在400nm和700nm处的吸光强度；以所述700nm和400nm处的吸光强度的差值A_700‑400为纵坐标，以所述抗坏血酸标准溶液的浓度为横坐标，进行线性拟合，得到标准曲线；2)将所述待测抗坏血酸溶液与所述五氧化二钒进行反应，得到混合液，测定其A_700‑400，与步骤1)中标准曲线对比，即得。本发明利用五氧化二钒纳米材料的吸光信号的变化实现对抗坏血酸的快速、灵敏、准确的定量检测。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种检测抗坏血酸浓度的方法。

背景技术

抗坏血酸是一种人体必需的维生素，对于预防和缓解坏血病、白癜风等疾病具有重要作用。此外，抗坏血酸还是一种高效安全的抗氧化剂，对于人体抗氧化应激损伤具有重要作用。检测血液中抗坏血酸浓度对于评估疾病发展和抗氧化应激水平具有重要作用。传统的抗坏血酸检测手段主要利用TMB比色法等实现。但是，血液中的血红素具有类过氧化氢酶性质，会对TMB显色产生影响。因此，目前常见的检测方法存在诸多缺陷，不能准确有效地进行血液中抗坏血酸浓度的定量检测。

发明内容

为了克服现有技术中的诸多缺陷，本发明提供了一种检测抗坏血酸浓度的方法，本发明利用五氧化二钒纳米颗粒的颜色信号的变化实现对抗坏血酸的快速、灵敏、准确的定量检测。

本发明所提供的检测抗坏血酸浓度的方法，包括如下步骤：

1)标准曲线的绘制：用多组已知的不同浓度的抗坏血酸标准溶液分别与五氧化二钒纳米材料水溶液进行反应，得到不同的混合液，利用紫外可见光谱分别测其在400nm和700nm处的吸光强度；以所述700nm和400nm处的吸光强度的差值(A_700-400)为纵坐标，以所述抗坏血酸标准溶液的浓度为横坐标，进行线性拟合，得到标准曲线；

2)待测抗坏血酸溶液中抗坏血酸浓度的测定：将所述待测抗坏血酸溶液与所述五氧化二钒纳米材料水溶液进行反应，得到混合液，利用紫外可见光谱测定其A_700-400，与步骤1)中所述标准曲线对比，即得到所述待测溶液中抗坏血酸浓度。

上述方法中，所述五氧化二钒纳米材料通过采用柠檬酸钠刻蚀块体五氧化二钒粉末制备得到；其中，所述可与抗坏血酸反应的柠檬酸钠与块体五氧化二钒粉末的质量比可为0.5～10：1，具体可为2：1；

所述制备五氧化二钒纳米材料的操作为：将块体五氧化二钒研磨成粉末，超声分散在去离子水中，再分别加入柠檬酸钠溶液、聚乙烯吡咯烷酮和过氧化氢溶液，在室温下搅拌后，加入丙酮后超声分散，离心分离，收集固体并用去离子水洗涤，即可。

所述五氧化二钒纳米材料为纳米颗粒，其直径可为3～12nm。

步骤1)中，所述多组可为至少5组；

所述抗坏血酸标准溶液的浓度可为50～500μM，具体可为50μM、100μM、150μM、200μM、250μM、300μM、350μM、400μM、450μM或500μM；

所述五氧化二钒纳米材料水溶液的摩尔浓度可为0.1mM～10mM，具体可为1mM。

所述五氧化二钒纳米材料水溶液与所述抗坏血酸标准溶液的体积比可为0.5～20：1，具体体积比可为1：1，体积比可为(50～2000)μL：100μL，具体体积比可为100μL：100μL；

步骤2)中，所述待测抗坏血酸溶液与所述五氧化二钒纳米材料水溶液的体积比同步骤1)中抗坏血酸标准溶液与五氧化二钒纳米材料水溶液的体积比；

步骤1)和步骤2)中，所述抗坏血酸标准溶液和所述待测抗坏血酸溶液均为其相应的水溶液形式；