[发明专利]一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的制备方法

说明书

一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的制备方法，所述适配体电化学传感器采用三电极系统，其工作电极的制备方法包括下述步骤：电极预处理，4‑羧基苯基重氮盐的修饰，羧基活化，适配体共价修饰等。然后将制备好的适配体电化学传感器利用差分脉冲伏安法制作标准曲线，最后根据土霉素标准曲线实现对样品中土霉素的测定。本发明可以实现土霉素的高灵敏高选择性检测，适配体通过共价结合的方式固定，有效提高传感器的性能，可以实现样品中土霉素的快速检测，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及电化学技术领域、食品安全检测技术领域，特别涉及一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的构建及应用。

背景技术

电化学生物传感器作为一种新型检测技术，具有灵敏度高，设备简单，成本低，检测目标范围广，响应速度快等特点，因此其在环境检测，食品和药物分析领域具有广泛的应用。核酸适配体是能与目标物特异性结合的短单链DNA或者RNA寡核苷酸，它可以作为电化学生物传感器的敏感识别元件，与特定靶物质进行结合，构建适配体电化学生物传感器。土霉素（Oxytetracycline，OTC）是四环素类抗生素中的一种，在农业、畜牧业和水产养殖业的广泛使用，动物源性食品中土霉素的残留对人体健康造成严重危害。基于土霉素的理化性质，目前传统的抗生素残留检测方依赖于大型仪器进行分析检测，仪器价格昂贵，需要复杂的样品前处理过程及专业的操作人员。因此，开发简便快捷、灵敏可靠且可用于检测食品中土霉素的快速检测具有十分重要的意义。

作为敏感识别元件，如何将适配体很好地固定在电极表面上将直接影响适配体电化学传感器的稳定性、再现性和灵敏度。现今报道的适配体电化学传感器中，常常采用吸附法将适配体固定在传感器的功能界面。吸附法的优点是方法简单、反应条件温和，缺点是适配体和固体表面之间的结合力很弱，所以使得在检测过程中适配体容易从电极表面脱离，从而难以实现对目标物的检测。而适配体通过共价键结合固定在电极表面可以大大提高适配体电化学传感器性能，增加传感器的稳定性和可重复性。因此，探索通过共价键结合法构建的适配体电化学适配体传感器至关重要。

发明内容

本发明旨在提供一种检测土霉素的适配体电化学传感器的构建方法及其在食品安全检测领域的应用。

所述适配体电化学传感器构建过程中适配体是通过共价结合的方式固定于传感器的传感功能界面。

本发明提供一种适配体电化学传感器及制备方法，其目的是解决通过吸附法制备的适配体电化学传感器的稳定性差，可重复性差的问题。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：用于土霉素检测的适配体电化学传感器的传感功能界面的构建策略是，先在玻碳电极（GCE）表面修饰4-羧基苯基重氮盐（4-CP），得到4-CP/GCE，是电极表面带有羧基，用EDC和NHS的混合溶液对电极表面的羧基进行活化，得到羧基活化电极（act/4-CP/GCE），然后将带有氨基的土霉素适配体滴涂在电极表面，孵育一段时间使其共价结合到电极表面，得到适配体修饰电极（apt/act/4-CP/GCE）。然后将制备好的适配体修饰电极接入三电极体系对土霉素的浓度进行测定。

进一步，所述适配体序列为：5'-氨基-C3-GGA ATT CGC TAG CAC GTT GAC GCTGGT GCC CGG TTG TGG TGC GAG TGT TGT GTG GAT CCG AGC TCC ACG TG-3'。

一种用于土霉素检测的适配体电化学传感器的制备方法，包括如下步骤：

（1）电极的预处理。