[发明专利]一种抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位多肽及其应用，属于生物医学技术领域。利用生物信息学方法预测MRGPRX2的优势抗原表位，筛选带有优势抗原表位的多肽序列；利用手动固相Fmoc法合成多肽序列，并利用分析型高效液相色谱仪分析了多肽的纯度；最后通过单克隆技术和多克隆技术制备出鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体，验证了建立的方法可用于临床检测。成功制备了双抗夹心MRGPRX2临床检测试剂盒，对临床上指导用药的安全性具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及一种抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位及其应用。

背景技术

药物引起过敏反应主要分为I型(速发型)、II型(细胞毒型)、III型(免疫复合物型)、IV型(迟发型)过敏反应及类过敏反应。类过敏反应的临床症状与过敏反应类似。但其反应的机理与I型过敏反应并不相同。当药物进入体内后，可直接导致肥大细胞释放内容物，触发过敏反应，且临床症状严重。过敏性休克发生于极少数接受治疗剂量药物的个体，没有致敏过程，患者血清IgE浓度也未见升高，但表现为典型的速发型变态反应症状，因此又被称为假药物变态反应。类过敏反应与抗原特异性免疫反应无关，在初次接触该类药物时发生，且与剂量、注射速度有一定的相关性。作为过敏主要效应器的肥大细胞，不仅可被特异性IgE附着而活化导致脱颗粒，引起I型过敏，也可被炎症因子、药物等多种促分泌物质直接激活导致细胞脱颗粒，引起临床常见的类过敏反应，使患者出现皮损症状即表现出红斑、荨麻疹、水肿等，严重者可导致哮喘、休克等症状。

类过敏反应的临床表现为局部皮肤症状如头面部、胸部及四肢的血管扩张、红斑、水肿、眼结膜充血；消化系统症状如流涎、恶心、呕吐、腹泻、厌食；呼吸循环系统症状如胸闷、心悸、血压升高、呼吸困难，严重的可发生呼吸循环衰竭，导致患者休克、死亡。

研究发现：类过敏刺激物首先激活细胞膜上的G蛋白，进而激活蛋白激酶C和Ca²⁺通道，使内质网释放Ca²⁺进入细胞内。伴随着细胞内Ca²⁺浓度增加，肥大细胞和嗜碱性粒细胞内的颗粒囊泡向胞浆膜移动并释放生物介质，从而引发类过敏反应。《Nature》等多种权威杂志的大量报道证实，类过敏刺激物所激活的G蛋白为MRGPRS(MAS-Related G Protein-oupled Receptors)，该受体不依赖IgE，可直接介导肥大细胞活化，诱导肥大细胞脱颗粒。此类受体在各种属、组织和器官的表达类型并不相同：其中MRGPRX2在人源肥大细胞中表达；该受体胞外区为感应区，特异性不高，当胞外被脱颗粒多肽、P物质、Compound 48/80、β-防御素等多种物质激活后，胞内区信号触发，引起肥大细胞激活，释放组胺等颗粒物质，刺激细胞旁分泌，从而影响到周围细胞。MRGPRX2是很多小分子药物引起类过敏、假性过敏的作用靶点。

目前针对MRGPRX2的用于实验室研究的抗体和蛋白还存在缺口，针对MRGPRX2的诊断和治疗还没有相关的临床检测试剂盒和药物。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位及其应用。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了一种抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位多肽，该优势抗原表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

优选地，所述多肽的表位是Mrgprx2蛋白第166-184个氨基酸序列。

本发明还公开了上述的抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位多肽在制备检测Mrgprx2蛋白的抗体中的应用。

本发明还公开了含有所述的抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位多肽的鼠单克隆抗体，以及含有所述的抗Mrgprx2抗体的优势抗原表位多肽的兔多克隆抗体。