[发明专利]一种用于乳腺癌诊断及预后的标志物以及其获得方法

权利要求书

1.一种用于乳腺癌诊断及预后的标志物，其特征在于，该标志物为5′-tiRNA^Val。

2.一种用于乳腺癌诊断及预后的标志物的获得方法，其特征在于，该方法包括：

(1)预测靶基因：通过基因本体功能富集分析、京都基因与基因组百科全书通路分析以及将GO、KEGG Pathway数据库进行交集比较找到交集基因；

(2)靶基因筛选及验证：

(21)通过分析判断得到前述交集基因存在互补结合5′-tiRNA^Val种子区域的MER；

(22)通过检测转染5′-tiRNA^Val模拟物后MDA-MB-231和MCF-7两株细胞中基因的相对表达量，找到FZD3在两株细胞中显著降低；

(23)通过荧光素酶报告基因检测，得到5′-tiRNA^Val是与FZD3的3′-UTR结合。

3.根据权利要求2所述的用于乳腺癌诊断及预后的标志物的获得方法，其特征在于，步骤(1)具体包括：通过基因本体功能富集分析显示5′-tiRNA^Val作用的靶标基因功能显著富集的GO主要分布在生物过程类别，细胞成分和分子功能分类；通过京都基因与基因组百科全书通路分析显示，17种生物学途径在乳腺癌组织中显著改变，涉及Wnt、mTOR、VEGF、P53信号通路；GO和KEGG Pathway中有显著差异的共同交集的是Axon guidance功能通路，选取相交的10条基因，再次与KEGG Pathway数据库中癌症通路Pathways in cancer相交，交集基因4条：FZD3、PIK3CB、PRKCA、PTCH1。

4.根据权利要求2所述的用于乳腺癌诊断及预后的标志物的获得方法，其特征在于，步骤(21)具体为通过microRNA.org、TargetScan分析判断得到前述交集基因存在互补结合5′-tiRNA^Val种子区域的MER。

5.根据权利要求2所述的用于乳腺癌诊断及预后的标志物的获得方法，其特征在于，5′-tiRNA^Val通过结合FZD3负向调控Wnt/β-catenin信号通路进而影响乳腺癌的进展。

6.根据权利要求5所述的用于乳腺癌诊断及预后的标志物的获得方法，其特征在于，5′-tiRNA^Val使MDA-MB-231和MCF-7细胞株中FZD3、β-catenin、c-Myc以及cyclinD1的蛋白水平降低，APC蛋白水平升高。