[发明专利]用于人体HER2基因扩增状态检测的组合套装

说明书

本发明提供了一种用于检测人体HER2基因扩增状态的组合套装，所述套装包含DNA提取样本和检测单元。所述DNA提取样本包括用于分离和提取人体HER2基因和参照基因DNA及其片段的组合物。所述检测单元包括用于定量检测人体HER2基因和参照基因DNA及其片段的拷贝数量和比值的核酸。本发明所述组合套装实现了快速、准确的HER2基因扩增状态的检测。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于检测人体HER2基因DNA及其片段扩增状态的组合套装。

背景技术

人体表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2)基因又称HER2基因，定位于染色体17q12-21.32。HER2基因是一种原癌基因，具有抑制凋亡、促进增殖、增加肿瘤细胞侵袭力、促进肿瘤血管新生和淋巴管新生的功能。HER2蛋白通常只在胎儿时期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。研究表明30％以上的人类肿瘤中存在HER2基因的扩增/过表达，如：乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等；其中20％～30％的原发性浸润性乳腺癌有HER2基因的扩增/过表达。HER2基因扩增/过表达不仅与肿瘤的发生发展相关，还是一个重要的临床治疗监测及预后指标，并且是肿瘤靶向治疗药物选择的一个重要靶点。

发明内容

目前常用的HER2基因扩增/过表达检测方法主要为免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)。由于受FFPE样本处理、HER2抗体选择、判读者经验和习惯等多种因素的影响，使用IHC检测HER2基因扩增/过表达的结果重复性和准确性不佳。而使用FISH检测HER2基因扩增/过表达，则面临操作过程复杂、检测流程时间长、检测试剂成本高、涉及的实验和检测仪器设备昂贵等实际问题。因此，现有HER2基因扩增/过表达的检测方法尚不能很好地满足检测需求。

针对以上技术现状，本发明提供了一种用于检测人体HER2基因扩增/过表达的组合物套装，本发明通过组合套装可以利用数字PCR对人体HER2基因和参照基因DNA及其片段进行定量检测，从而实现HER2基因扩增/过表达的快速、便捷、灵敏、准确的检测。

具体来说，本发明涉及如下内容：

1.一组核酸，其为用于分别定量检测人体HER2基因及其片段和参照基因DNA及其片段的拷贝数量的一组核酸，其中，所述参照基因为人体17号染色体着丝粒序列(CEP17)。

2.根据项1所述的核酸，其中，

所述一组核酸为用于DNA聚合酶链式反应(PCR)以分别扩增所述人体HER2基因及其片段和所述参照基因DNA及其片段的正向和反向引物，

所述正向和反向引物对人体HER2基因DNA及其片段进行PCR扩增的区间位于HER2蛋白编码区(protein coding region)。

3.根据项2所述的核酸，其中，

所述正向和反向引物对人体HER2基因及其片段和参照基因DNA及其片段进行PCR扩增得到的产物的长度在60个碱基以下；

优选地，其对HER2基因和参照基因进行PCR扩增的产物的长度为40-50个碱基。

4.根据项2或3所述的核酸，其中，

在所述正向或反向引物中至少一个引物的核酸序列的5’端包含一段非人源的DNA；

优选地，所述非人源的DNA与现已发现的所有生物DNA序列既不相同，也不互补。

5.根据项4所述的核酸，其中，

所述非人源的DNA的长度为10-30个碱基；

优选地，所述非人源的DNA的长度为15-20个碱基。

6.根据项5所述的核酸，其中，