[发明专利]一种复配生防菌剂及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种复配生防菌剂及其制备方法与应用，属于微生物技术领域。为解决单一菌种防效不稳定，抑菌谱范围窄的问题，本发明提供了一种复配生防菌剂，包括一定体积比的哈茨木霉菌悬液和粉红粘帚菌菌悬液，所述哈茨木霉菌悬液和粉红粘帚菌菌悬液的活菌数均为10⁶cfu/mL。本发明提供的复配生防菌剂抑菌谱广、拮抗作用强、持效期长、生产成本低、发酵工艺简单，将其应用于农业生物防治方面，可防治灰霉病菌、茎腐病菌、立枯病菌、炭疽病菌、镰刀菌和枯萎病菌等真菌引起的作物病害；其对农作物种子及幼苗具有促生作用，可促进种子萌发、胚根和幼苗生长，还具有防腐保鲜的作用，将其应用于果蔬防腐保鲜能够降低腐烂率和失重。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种复配生防菌剂及其制备方法与应用。

背景技术

目前农业生产上防治灰霉病仍采取以化学防治为主的防治对策。常用杀菌剂主要包括苯丙咪唑类、二甲酰亚胺类、N-苯基氨基甲酸酯类、苯胺基嘧啶类和保护性杀菌剂。这些化学杀菌剂作用机理各不相同，其中苯并咪唑类是通过与番茄灰霉病病菌的微管蛋白相结合，破坏其功能，从而抑制病菌菌丝的分隔和伸长，阻碍细胞的有丝分裂和形态建成；而二甲酰亚胺类杀菌剂的作用机理当前尚不明确，有报道称它可能是通过干扰病菌的细胞功能、影响膜渗透性使细胞破裂而实现。虽然上述化学机制防治效果可观，但由于灰霉病病菌在遗传上存在异核现象，种群中存在多样性，在药剂自然选择的作用下，易产生抗性菌株，从而导致药剂的使用效果逐步下降，甚至是丧失疗效。因而化学防治虽短期防效明显，但长期施用化学农药必定会使番茄果实品质下降、病原菌产生抗药性、严重污染环境、危及人畜健康，甚至破坏农业生态系统。

但当前研究的针对番茄灰霉病的生防菌剂多数是基于单一菌种制成，其在实际的生产应用上经常存在防效不稳定、抑菌谱范围窄等现象。

发明内容

为解决单一菌种防效不稳定，抑菌谱范围窄的问题，本发明提供了一种复配生防菌剂及其制备方法与应用。

本发明的技术方案：

一种复配生防菌剂，包括一定体积比的哈茨木霉菌悬液和粉红粘帚菌菌悬液，所述哈茨木霉菌悬液和粉红粘帚菌菌悬液的活菌数均为10⁶cfu/mL。

进一步的，所述哈茨木霉菌悬液和粉红粘帚菌菌悬液的体积比为0.5～1.5:1。

一种复配生防菌剂的制备方法，包括如下步骤：

步骤一、取麸皮、稻糠、麦粒按照一定质量比配制固体发酵培养基，蒸汽压力灭菌；

步骤二、将哈茨木霉发酵种子液或粉红粘帚菌发酵种子液接种于步骤一制备的已灭菌固体发酵培养基中，室温发酵15天，每天保持对固体发酵培养基水平振荡一次；

步骤三、将步骤二完成发酵所得发酵物平铺至无菌托盘中，用无菌滤纸覆盖在发酵物上，每天对托板中的发酵物进行搅拌，持续10天，待托盘中的发酵物完全干燥，对发酵物进行粉碎、过筛得到哈茨木霉菌粉或粉红粘帚菌菌粉，分别取哈茨木霉菌粉或粉红粘帚菌菌粉与无菌水混合配制含有一定活菌数的哈茨木霉菌悬液或粉红粘帚菌菌悬液，按一定体积比将哈茨木霉菌悬液与粉红粘帚菌菌悬液混合即得到复配生防菌剂。

进一步的，步骤一所述麸皮、稻糠、麦粒的质量比为1.67:1:7.23；所述固体发酵培养基的初始含水量为75％；所述蒸汽压力灭菌的温度为121℃，压力为20psig，灭菌时间为30min，重复灭菌3次；步骤二所述哈茨木霉发酵种子液或粉红粘帚菌发酵种子液的接种量为3mL/40g。

进一步的，步骤三所述发酵物粉碎所得菌粉为200目菌粉，所述哈茨木霉菌悬液或粉红粘帚菌菌悬液所含活菌数为10⁶cfu/mL，所述哈茨木霉菌悬液和粉红粘帚菌菌悬液的体积比为0.5～1.5:1。

本发明提供的一种复配生防菌剂在农业生物防治方面的应用。