[发明专利]一种重组抗体样T细胞抗原受体、T细胞抗原受体偶联药物、双特异性分子及应用

权利要求书

1.一种重组抗体样T细胞抗原受体，其特征在于，为异源二聚体，第一亚基包括依次连接的ECDα-铰链区-CH2-CH3，第二亚基包括依次连接的ECDβ-铰链区-CH2-CH3，其中，ECDα和ECDβ分别为T细胞抗原受体1G4113的α链和β链的胞外结构域，铰链区、CH2、CH3均为IgG1的结构，并且第一亚基和第二亚基的两个CH3之间分别使用knob-into-hole技术设计成knob结构和hole结构。

2.如权利要求1所述的重组抗体样T细胞抗原受体，其特征在于，所述第一亚基的氨基酸序列如SEQ ID No.12所示；所述第二亚基的氨基酸序列如SEQ ID No.13所示。

3.如权利要求2所述的重组抗体样T细胞抗原受体，其特征在于，所述第一亚基的编码基因序列如SEQ ID No.8所示；所述第二亚基的编码基因序列如SEQ ID No.9所示。

4.如权利要求1～3任一所述重组抗体样T细胞抗原受体在制备抗肿瘤药物中的应用。

5.一种T细胞抗原受体偶联药物，其特征在于，在如权利要求1～3任一所述重组抗体样T细胞抗原受体的第一亚基和/或第二亚基的C末端通过sortase A酶催化转肽反应偶联上vcMMAE，其中vc为缬氨酸-瓜氨酸二肽接头，MMAE为海兔毒素。

6.如权利要求5所述的T细胞抗原受体偶联药物在制备抗肿瘤药物中的应用。

7.一种T细胞抗原受体偶联药物，其特征在于，在如权利要求1～3任一所述重组抗体样T细胞抗原受体的第一亚基和/或第二亚基的C末端偶联上荧光分子Cy5，

所述T细胞抗原受体偶联药物的制备方法包括以下步骤：

(1)提供第一亚基和/或第二亚基C末端连接有连接臂LPETG的重组抗体样T细胞抗原受体，通过sortase A酶催化转肽反应与GGG-(PEG)₃-N₃偶联获得C末端连接有N₃接头的重组抗体样T细胞抗原受体；

(2)提供Cy5-DBCO，将步骤(1)C末端连接有N₃接头的重组抗体样T细胞抗原受体与Cy5-DBCO通过N₃接头与DBCO接头发生环加成反应，制得所述T细胞抗原受体偶联药物。

8.如权利要求7所述的T细胞抗原受体偶联药物在制备肿瘤成像药物中的应用。

9.一种双特异性分子，其特征在于，在如权利要求1～3任一所述重组抗体样T细胞抗原受体的第一亚基和/或第二亚基的C末端偶联上抗CD3ε抗体，

所述双特异性分子的制备方法包括以下步骤：

(1)提供第一亚基和/或第二亚基C末端连接有连接臂LPETG的重组抗体样T细胞抗原受体，通过sortase A酶催化转肽反应与GGG-(PEG)₃-N₃偶联获得C末端连接有N₃接头的重组抗体样T细胞抗原受体；

(2)提供重链的C末端连接有连接臂LPETG的抗CD3ε抗体，通过sortase A酶催化转肽反应与GGG-(PEG)₄-DBCO偶联获得重链的C末端连接有DBCO接头的抗CD3ε抗体；

(3)将步骤(1)C末端连接有N₃接头的重组抗体样T细胞抗原受体与步骤(2)重链的C末端连接有DBCO接头的抗CD3ε抗体通过N₃接头与DBCO接头发生环加成反应，制得重组抗体样T细胞抗原受体-抗CD3ε抗体双特异性分子。

10.如权利要求9所述的双特异性分子在制备抗肿瘤药物中的应用。