[发明专利]一种小鼠牙周病模型建立方法

说明书

本发明公开了一种小鼠牙周病模型建立方法，包括如下步骤：1)将待建模小鼠腹腔麻醉，并将其躺位固定在鼠台上；2)将小鼠头部垫起，用开口器使小鼠稳定张口，暴露下颌磨牙区；然后用生理盐水清洁下颌磨牙与颊舌侧牙龈，用干棉球使术区充分干燥；3)利用显微持针器，将缝线嵌入左侧下颌第一第二磨牙邻面接触点下方；确保嵌入后，在下颌第一磨牙近中牙颈部位置打结；4)检查缝线打结的稳定度，确认稳固后完成牙周病模型的建立。本发明基于下颌第一磨牙实现一种新型小鼠牙周炎模型的建立方法。通过对小鼠建模局部组织行影像学分析的结果，证明了该方法可成功建立小鼠牙周炎模型，充分模拟临床牙周病的病理学过程。

技术领域

本发明属于牙周病学技术领域，特别涉及到一种小鼠牙周病模型建立方法。

背景技术

牙周病是一种常见的慢性感染性口腔疾病，其直接诱发因素为龈沟中的菌斑生物膜。作为导致失牙的主要疾病，牙周病表现为以牙槽骨吸收为特征的慢性进行性牙周组织破坏。流调结果显示，我国儿童及青少年牙周病患病率高达90％，成年人牙周病患病率可高达97％，而牙周病的流行严重影响了我国成年人的咀嚼功能、生活质量及心理健康，因此，利用模式动物对牙周病的发生发展机制进行进一步研究十分必要。

小鼠作为啮齿类实验动物的代表，具有繁殖速度快，局部组织结构与人类类似的特点，因此，利用以小鼠为代表的实验动物建立实验性牙周炎模型，为研究人员探讨牙周炎的病因及病理过程提供了有利的研究条件。

传统的小鼠牙周炎模型建立方法包括局部注射菌液或细菌内毒素(LPS)法，丝线结扎法等，受限于操作难度与小鼠的解剖条件，其建模牙位均位于上颌第二磨牙区，而基于该牙位的建模存在有下列不足：

1)采用局部注射法建模时，由于进针角度限制，LPS/菌液只能从磨牙间隙的腭侧注入，因此诱导出的炎症分布不均匀且诱导周期较长；而采用丝线结扎法建模时，由于小鼠上颌颊侧前庭沟处无骨性结构保护，建模时易引发局部大出血。

2)上颌第二磨牙的牙体结构与人类磨牙差异较大，且牙周组织量少，从解剖结构上不能充分模拟人类牙周组织形貌，且在成模取材时，RNA与蛋白质的产量获得均较少，为后期的分子生物学实验带来困难。

3)由于上颌第二磨牙位于小鼠口内的位置较深，因此对以牙周炎作为影响因素的其他模型研究带来困难，如研究牙周炎微环境对即刻种植手术对骨结合的影响时，由于上颌第二磨牙的解剖位置较为深入，即使牙周炎模型建立成功，微型种植体也无法植入到该位点中，为后期的复合模型研究带来困难。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中的不足，提供一种小鼠牙周病模型建立方法，以解决现有技术中存在的问题。

本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：

一种小鼠牙周病模型建立方法，包括如下步骤：

1)将待建模小鼠腹腔麻醉，并将其躺位固定在鼠台上；

2)将小鼠头部垫起，用开口器使小鼠稳定张口，暴露下颌磨牙区；然后用生理盐水清洁下颌磨牙与颊舌侧牙龈，用干棉球使术区充分干燥；

3)利用显微持针器，将缝线嵌入左侧下颌第一第二磨牙邻面接触点下方；确保嵌入后，在下颌第一磨牙近中牙颈部位置打结；

4)检查缝线打结的稳定度，确认稳固后完成牙周病模型的建立。

进一步的，牙周病模型建立完成后，每隔两天检查缝线是否在位；若出现脱落情况，则按照步骤步骤1)-4)重新建立牙周病模型。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

1)由于下颌磨牙颊侧有骨质结构阻挡，采用丝线结扎法，不易发生因器械滑入颊侧而引发的大出血；若采用注射法，由于下颌磨牙解剖位置较浅，注射位点可均匀覆盖牙间隙颊舌侧，可加快成模速度。