[发明专利]一种同时测定清瘟解毒片中八种活性成分的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定清瘟解毒片中八种活性成分的方法，包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)分离检测：色谱柱为Agilent TC‑C₁₈；流动相组成为乙腈:0.2％磷酸，梯度洗脱条件为0‑14min 13％‑14％乙腈，14‑15min 14％‑22％乙腈，15‑20min 22％‑22％乙腈，20‑25min 22％‑25％乙腈，25‑30min 25％‑35％乙腈，30‑38min 35％‑43％乙腈，38‑40min 43％‑53％乙腈，40‑45min 53％‑53％乙腈，45‑50min 53％‑83％乙腈；检测波长为0‑15min 303nm，15‑20min 230nm，20‑50min 280nm；流速为1.0mL·min^‑1；柱温为30℃；进样量为10μL。该方法色谱峰分离良好，专属性强，准确可靠，简单方便，为清瘟解毒片的质量控制提供理论依据。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及中成药清瘟解毒片中活性成分检测方法，具体的说是一种同时测定清瘟解毒片中八种活性成分的方法。

背景技术

中成药作为我国医药学宝库的重要组成部分，在推动我国医药产业的发展过程中具有不可替代的作用。由于中成药有效成分复杂，药效物质基础不明确，单味药材易受品种、产地、加工方法等因素的影响，使得中成药的质量评价成为阻碍中成药走向现代化与国际化的障碍。随着现代分析测试手段的发展，中成药的质量控制已能应用高效液相色谱法对某种药物的主要化学成分进行定性和定量分析，打破了以往单一的依靠显微鉴定和TLC分析的手段对中成药进行质量控制，然而这种方法大多数局限在单一化学成分的定量上，至少现行的2015版《中国药典》大多数情况下仍是选取某一种化学成分对中药材或中成药进行定量分析。中成药作为一个完整的制剂，强调的是各味药材的协同作用，以单一有效成分或指标成分难以真正控制中成药质量。因此，必须利用现代分离技术实现对中成药中的多个有效成分进行综合定性和定量分析，揭示中成药有效成分的多样性及可控性，从单一指标向多种检测指标发展，完善中成药质量控制的手段，促使中成药进一步走向国际化。

清瘟解毒片为浅黄色糖衣片，除去糖衣后显棕褐色，气微香，味甘，苦，主要用于时疫感冒，发热，怕冷，无汗头痛，口渴咽干，四肢酸痛，痄腮肿痛。在《卫生部药品标准》(中药成分制剂)第二册及2010年版《中国药典》一部等质量标准中增加了葛根，赤芍，白芷的薄层鉴别及黄芩苷的含量测定。由于清瘟解毒片中含有天花粉，葛根，黄芩，赤芍，白芷等十多种成分，现有质量标准，专属性不强，不能全面评价该药品质量。已有研究论文测定清瘟解毒片中单一组分，如葛根素，芍药苷，欧前胡素和哈巴俄苷，未见其多组分同时测定的报道。因此有必要建立一种快速、准确、全面分离、检测清瘟解毒片多种活性成分的方法，以便更好地对该产品进行质量监控和用药安全。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时测定清瘟解毒片中八种活性成分的方法，该方法可同时测定清瘟解毒片中葛根素、芍药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷、牛蒡苷、连翘苷和牛蒡子苷元的含量，方法简单，稳定、重现性好，可用于该药品的质量控制。

为实现上述目的，本发明是采用如下技术方案实现的：

一种同时测定清瘟解毒片中八种活性成分的方法，具体步骤如下：

(1)对照品溶液的制备：分别精确称量对照品葛根素、芍药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷、连翘苷、牛蒡苷和牛蒡子苷元置于5mL容量瓶中，加甲醇定容摇匀，浓度分别为0.404mg·mL^-1、0.35mg·mL^-1、0.609mg·mL^-1、0.376mg·mL^-1、0.388mg·mL^-1、0.29mg·mL^-1、0.594mg·mL^-1和0.464mg·mL^-1；之后分别精密吸取八种单个对照品储备液50μL，置于同一5mL容量瓶中，加入甲醇定容，即得混合对照品溶液；