[发明专利]一株铜绿假单胞菌噬菌体及其应用

说明书

本发明涉及一株铜绿假单胞菌噬菌体及其应用，具体公开了一株能够入血的噬菌体及其应用，该噬菌体单体为铜绿假单胞菌噬菌体，拉丁名P.Aeruginosaphage，被命名为ASP11，对铜绿假单胞菌有广谱的杀菌能力，噬菌体ASP11保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2018年9月26日，保藏编号为CGMCC NO.16395；体内和体外试验均显示该噬菌体对铜绿假单胞菌具有强烈的裂解作用，为铜绿假单胞菌感染疾病的预防、治疗提供了有效的方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一株能够特异性裂解铜绿假单胞菌菌株的噬菌体分离物及其应用。

背景技术

水貂出血性肺炎是由铜绿假单胞菌引起的一种急性传染病，发病迅速，不易控制，曾在多个国家和地区呈地方性流行，导致大批水貂死亡，造成了严重的经济损失。铜绿假单胞菌存在自然性和获得性多种机制从而可抵抗多种抗生素，这些机制包括外排泵、抗生素降解、修饰酶系统及降低膜渗透性的功能等，很容易使该菌产生耐药性且临床分离的许多株铜绿假单胞菌表现出对多种抗生素同时耐药。污染铜绿假单胞菌的肉类饲料和患畜的粪便、尿、分泌物以及污染的水源和环境，都是该病的传染源，主要通过口腔和鼻等呼吸道感染该病。而集约化养殖环境，增加了水貂感染铜绿假单胞菌病的机会。

噬菌体是一类能特异性感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体的病毒，可以从污水、粪便以及土壤等自然环境中分离得到。噬菌体具有严格的宿主特异性，铜绿假单胞菌噬菌体只特异性感染铜绿假单胞菌，对人、动物和植物没有感染作用，所以噬菌体具有安全性的特征，对人和动植物没有感染作用。噬菌体是一类病毒，只能依附于相应的宿主菌存在。当噬菌体与相应的宿主菌接触后，就会吸附在宿主菌表面并侵入宿主菌细胞内，在胞内进行增殖，之后裂解细菌释放更多的噬菌体。噬菌体裂解细菌具有高效的特点，一个噬菌体颗粒感染宿主菌后能迅速生成几百个子代噬菌体颗粒，每个子代噬菌体颗粒又可感染细菌释放更多的子代噬菌体，如此重复只需4次，一个噬菌体颗粒便可使几十亿个细菌裂解死亡，所以噬菌体能够作为一种具有杀菌作用的高效生物消毒剂和药物。

噬菌体消毒试验有过报道，但是通过口服能够入血的噬菌体未见报道。本发明中应用的噬菌体单次口服后能持续存在8h，且动物体内带有铜绿假单胞菌时，存在时间更长，含量会逐渐升高，且该噬菌体还能对动物体内的铜绿假单胞菌有明显的抑制杀灭作用。

发明内容

本发明提供了一株能够通过口服、肌肉注射、腹腔注射入血的噬菌体及其应用，旨在解决养殖场因水貂出血性肺炎发病急而治疗不及时，且因致病菌耐药性而导致用药无效等困难。水貂的抗生素治疗面临严重的细菌耐药性问题，铜绿假单胞菌存在多种耐药机制，很容易产生耐药性。国内的研究者做过很多类似的噬菌体消毒试验，但是没有既有环境消毒作用又能通过口服、肌肉注射、腹腔注射入血的噬菌体研究，本发明提供的噬菌体不仅能通过多种方式入血，还能对水貂体内的铜绿假单胞菌起到抑制和杀灭作用，从而达到保健、预防和治疗等多方面的良好效果。

本发明的目的在于提供一株具有口服、肌肉注射、腹腔注射入血能力的铜绿假单胞菌噬菌体，该噬菌体的单体为铜绿假单胞菌噬菌体，拉丁名P.Aeruginosa phage，被命名为ASP11，对铜绿假单胞菌有广谱的杀菌能力，噬菌体ASP11保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2018年9月26日，保藏编号为CGMCC NO.16395。

该噬菌体对铜绿假单胞菌具有强烈的裂解作用，为工业化生产噬菌体及其用于环境消毒和噬菌体防治由铜绿假单胞菌引起的毛皮动物的出血性肺炎提供了噬菌体来源。

该噬菌体可用于工业生产，可由宿主菌特异性扩增，可作为生物消毒剂应用于毛皮动物或禽类饲养场以及动物饲养、食品、药品、医疗器械厂、医院等其他人类活动场所的环境消毒剂。

该噬菌体作为饲料添加剂添加入水貂的饲料中，对水貂体内的铜绿假单胞菌具有明显的抑制杀灭效果，能有效预防铜绿假单胞菌引起的水貂出血性肺炎病的发生。