[发明专利]一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法有效
| 申请号: | 201910440536.8 | 申请日: | 2019-05-24 |
| 公开(公告)号: | CN110331139B | 公开(公告)日: | 2021-08-24 |
| 发明(设计)人: | 郑建永;蔡鑫勇;章银军;汪钊 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
| 主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/089 |
| 代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
| 地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 南极 酵母 脂肪酶 固定 方法 | ||
1.一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述方法是:将二甲基咪唑水溶液、硝酸锌水溶液与南极假丝酵母脂肪酶B混合,在25℃、200 rpm磁力搅拌条件下反应30min,再加入非极性大孔吸附树脂和交联剂,在15-45℃、200 rpm水浴条件下交联反应5 h,真空抽滤机抽滤,滤饼干燥,获得固定化南极假丝酵母脂肪酶B;所述交联剂为下列之一:戊二醛或聚乙烯亚胺;所述非极性大孔吸附树脂为D101-1。
2.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述二甲基咪唑水溶液和硝酸锌水溶液是将二甲基咪唑和硝酸锌分别与去离子水混合,在40Hz、25℃下超声30min制成。
3.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述二甲基咪唑水溶液浓度为0.3125 mol/L,所述硝酸锌水溶液浓度为5.21~12.50μmol/mL。
4.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述南极假丝酵母脂肪酶B为酶量72mg/ml的南极假丝酵母脂肪酶B酶液。
5.如权利要求3所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述二甲基咪唑水溶液体积用量以南极假丝酵母脂肪酶B重量计为130-850ml/g;所述硝酸锌水溶液与二甲基咪唑水溶液体积比为25-60:1。
6.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述非极性大孔吸附树脂与南极假丝酵母脂肪酶B质量比为1-10:1。
7.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于所述交联剂体积用量以南极假丝酵母脂肪酶B质量计为2-17 ml/g。
8.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于交联剂为质量浓度25%的聚乙烯亚胺水溶液。
9.如权利要求1所述南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,其特征在于交联温度为30℃,滤饼干燥温度为35℃。
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