[发明专利]一种降血压的牡丹蛋白肽的制备方法

说明书

本发明公开了一种降血压的牡丹蛋白肽的制备方法，具体制备方法如下，以带种皮的牡丹籽粕为原料，制备牡丹籽蛋白，向牡丹籽蛋白液中加入复合蛋白酶，所述复合蛋白酶为菠萝蛋白酶，蛋白酶K，胰凝乳蛋白酶，酶解得到牡丹蛋白肽，牡丹蛋白肽用环糊精包埋去除辛辣味，所述复合蛋白酶在最适酶解条件下，得到特定分子量800Da‑1200Da之间的牡丹蛋白肽，得率在95％以上，在复合酶的作用下，所得牡丹蛋白肽上有作用于血管紧张素转化酶ACE的位点暴露，能够抑制ACE的活性，动物实验证明，牡丹蛋白肽具有降血压的效果，本方法可直接获得特定分子量的牡丹蛋白肽，无需超滤分级，提高制备效率，降低生产成本。

技术领域

本发明涉及一种降血压的牡丹蛋白肽及其制备方法与应用，属于食品加工技术领域。

背景技术

高血压是一种常见的心血管疾病，近年来，高血压的患病率呈现逐年上升的趋势，据统 计，我国目前有高血压病人1.6亿，并且以每年新发病例360万的速度递增，高血压病人长 期得不到有效控制，还将会引起更严重的心脑血管疾病，高血压的病因很多，与年龄、遗传 因素、职业和环境、体重等都有关系，目前治疗高血压的药物有很多，而且需要长期服用， 开发出无毒副作用的高血压药物对高血压病人非常有益。

近年来牡丹籽作为生产牡丹皮的副产物，产量丰富，含油量高，有文献报告牡丹籽油中 不饱和脂肪酸含量高达87.60％，其中亚油酸的含量占22.19％，亚麻酸占35.70％，油酸占 27.14％，亚油酸和亚麻酸是人体必需脂肪酸，具有降血脂，降胆固醇和促进脂肪代谢，增强 免疫，预防冠心病等生理活性，因此近年来牡丹籽的使用越来越多，产生的牡丹籽粕也越来 越多，对牡丹籽粕产物牡丹蛋白的研究也正在成为热门的研究课题。

发明内容

本发明的目的在于克服上述问题，研究出可得到特定分子量牡丹蛋白肽的方法，该方法 制备安全，工艺简便，不用利用超滤分级，提高了制备效率，降低了生产成本。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

一种牡丹蛋白肽的制备方法，所述方法步骤为，

S1：将牡丹籽粕粉碎，用超临界CO₂萃取脱脂，过筛，按料液比1:20～30与水混合，加 入NaOH调节pH9～10，50～60℃条件下磁力搅拌60～70min，离心(3500～4000r/min，13～18min)， 取上清液，加入HCl，调节pH3.0～4.0，离心(3500～4000r/min，13～18min)，沉淀用少量去 离子水清洗至中性后冷冻干燥，得牡丹籽蛋白；

S2：取步骤S1所得蛋白2份，加入复合蛋白酶进行酶解，所述复合蛋白酶包括菠萝蛋白 酶1～2份，蛋白酶K 3～4份，胰凝乳蛋白酶6～7份，酶活力100～120u/mL，酶解反应pH为 6.0～7.0，反应温度45～55℃，反应时间3～4h，酶解后，高温灭活，加入10％～15％的HCl，调 节pH至4.0～4.5，在80～100r/min条件下搅拌，使未酶解的牡丹蛋白呈凝乳状析出，过滤分 离，提纯后冷冻干燥得牡丹蛋白肽，SDS-PAGE电泳测定蛋白肽分子量为800Da-1200Da之间， 用凯氏定氮法计算其得率在95％以上。

蛋白酶K具有降解天然蛋白质的能力，菠萝蛋白酶能够水解多肽，胰凝乳蛋白酶对蛋白 质有多个酶切位点，控制酶解条件结合蛋白酶K和菠萝蛋白酶，有助于牡丹蛋白肽上的作用ACE的位点暴露，使水解得到的牡丹蛋白肽有降血压作用。

优选的，采用带种皮的牡丹籽粕为原料，种皮中部分可溶性成分溶解在蛋白肽中，使蛋 白肽活性较高。

优选的，步骤S1牡丹籽粉碎过110～130目筛。

优选的，步骤S2的冷冻干燥温度为-40℃，干燥10h，冷冻干燥处理能够保持牡丹蛋白肽 的ACE抑制活性。

优选的，所述酶解反应pH值为6.5，反应温度为45℃，反应时间为3.5h。