[发明专利]适用动物源性食品班布特罗胶体金快速检测卡及制备方法有效
申请号: | 201910430797.1 | 申请日: | 2019-05-22 |
公开(公告)号: | CN110275012B | 公开(公告)日: | 2022-07-08 |
发明(设计)人: | 郭燕;李鹏;田杰;刘荣荣;陆武;张潇耀;陈思敏;曼古努尔·尼合买提;张艳;包文雯 | 申请(专利权)人: | 克拉玛依市市场监督管理局 |
主分类号: | G01N33/532 | 分类号: | G01N33/532;G01N33/577;G01N33/558 |
代理公司: | 西安亚信智佳知识产权代理事务所(普通合伙) 61241 | 代理人: | 段国刚 |
地址: | 834099 新疆维吾尔*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适用 动物 食品 班布特罗 胶体 快速 检测 制备 方法 | ||
1.一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡,其特征在于,包括人工制备的班布特罗单克隆抗体和PC-2羊抗鼠抗体成分的胶体金快速检测卡;
所述检测卡为检测班布特罗成分,检测卡包括:包括含有胶体金标记的班布特罗单克隆抗体溶液喷涂的金标垫、绘有T线和C线的NC膜、样品垫以及吸水垫,进行组装;
所述班布特罗单克隆抗体的制备过程为:
使用班布特罗半抗原-BSA作为免疫原,进行小鼠免疫,不同的细胞株产生的腹水效价存在一定的差异,最高抗体效价可达到1:16W;将获得单克隆抗体,冻干备用。
2.如权利要求1所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法,其特征在于,所述胶体金快速检测卡的制备具体过程为:
(1)选取1.35%红色金颗粒标记取1mL胶体金溶液于2mL试管中,加入0.2M K2CO3 1.5-3.0 µL/mL,混匀;加入抗体原液0.5-2.5µL,混匀后静置5min;加入含10% BSA的封闭液10µL/mL,混匀后静置5min;4℃,12000r/min离心,5min;1/20体积的复溶液复溶,喷涂于已封闭好的玻璃纤维素膜上,迅速转移至冷冻干燥机内进行冷冻干燥,制作成为金标垫;
(2)用包被液将抗体稀释,将PC-2羊抗鼠抗体250倍稀释制得C液,将人工制得的班布特罗抗体稀释50倍为作为T液;
(3)将步骤(2)中制备获得的C液、T液分别在NC膜上划线,从左至右顺序依次为T液和C液,置37℃干燥20~40min,干燥后浸没入封闭液封闭,置于37℃恒温箱中干燥备用;
(4)将样品垫、步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)中制备获得的金标垫、NC膜以及吸水垫裁剪为宽度相同的长方形,依次进行重叠组装,并设置加样孔,组装成检测班布特罗的检测卡。
3.如权利要求2所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法,其特征在于,所述的金标垫制备过程中加入0.2M K2CO3的量为1.5 µL/mL。
4.如权利要求2所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法,其特征在于,金标垫制备过程中加入抗体原液的量为1.5µL。
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