[发明专利]木瓜发酵饮料中有机酸含量的检测方法

说明书

本方案公开了有机酸检测技术领域的木瓜发酵饮料中有机酸含量的检测方法，包括：一、分别取酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸标准品，并用超纯水配制成所需浓度标准品溶液；二、取木瓜发酵饮料，加水稀释并通过0.45μm滤膜过滤后得到待测样液；三、采用高效液相色谱法测定：其中，固定相为Agilent SB‑AQ色谱柱，流动相为50mmol/L磷酸盐缓冲溶液，pH2.1，流速为1mL/min；检测波长：210nm；柱温25℃；进样量为5μL；四、以标准品溶液的峰面积为纵坐标，以标准品溶液浓度为横坐标，分别绘制标准品溶液的标准曲线，根据标准曲线计算待测样液中有机酸的含量。本方案的检测方法可快速检测出木瓜发酵饮料中各有机酸的含量。

技术领域

本发明属于有机酸检测技术领域，特别涉及木瓜发酵饮料中有机酸含量的检测方法。

背景技术

木瓜发酵饮料为黔北地区的传统饮品，尤其在正安县等地区有上百年的木瓜种植历史。当地的木瓜品种多以野木瓜命名，是贵州省地理保护品种。以野木瓜发酵后制得的饮品为木瓜发酵饮料，近年来木瓜发酵饮料的生产规模逐渐扩大。

木瓜中的酸类物质为其主要生物活性成分，主要包括甲酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、、三帖酸、齐墩果酸、熊果酸、抗坏血酸、莽草酸等。由于木瓜发酵饮料经过长达3个月以上的发酵，其组分相对于木瓜果实差别很大。经过研究发现，木瓜发酵饮料中的代表性活性成分主要有酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸。由于木瓜发酵饮料中有机酸的变化较大，且各有机酸在检测时存在较大差异，目前尚没有针对木瓜发酵饮料中的主要有机酸含量进行测定的方法。本发明采用高效液相色谱仪针对木瓜发酵饮料中的有机酸进行测定。本方法操作简单、结果准确、稳定性强，能够满足对木瓜发酵饮料中有机酸检测的应用。

发明内容

本发明意在提供木瓜发酵饮料中有机酸含量的检测方法，以实现对木瓜发酵饮料中有机酸进行高效检测。

本方案中的木瓜发酵饮料中有机酸含量的检测方法，包括以下步骤：

步骤一、分别取酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸标准品，并用超纯水配制成所需浓度标准品溶液；

步骤二、取木瓜发酵饮料，加水稀释并通过0.45μm滤膜过滤后得到待测样液；

步骤三、采用高效液相色谱法测定：其中，固定相为Agilent SB-AQ色谱柱，流动相为50mmol/L磷酸盐缓冲溶液，pH为2.1，流速为1mL/min；检测波长：210nm；柱温25℃；进样量为5μL；

步骤四、以标准品溶液的峰面积为纵坐标，以标准品溶液浓度为横坐标，分别绘制酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸的标准曲线，根据外标法计算待测样液中酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸的含量。

本方案的有益效果：本方案对酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸采用同样检测波长，大大降低了木瓜发酵饮料内有机酸的检测复杂程度；同时采用不同的标准浓度，使得对木瓜发酵饮料内有机酸的检测更加精准；同时对柱温的要求也有所降低。

进一步，所述酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸、抗坏血酸和莽草酸标准品配制的标准品溶液浓度分别为：酒石酸30mg/L、苹果酸70mg/L、抗坏血酸6mg/L、柠檬酸100mg/L、莽草酸2mg/L、丁二酸160mg/L和富马酸1.5mg/L。通过采用不同的浓度基准，有利于提高对木瓜发酵饮料内有机酸的检测精度。

进一步，所述木瓜发酵饮料为经常温发酵后，再加糖、水得到的原液或经调配后的饮品。