[发明专利]一种检测量子点对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法

权利要求书

1.一种检测量子点对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配制碲化镉量子点溶液；

(2)用碲化镉量子点溶液注射小鼠，进行急性暴露试，记录小鼠在注射后体重变化，同时判断碲化镉量子点对小鼠的毒性作用；

(3)将步骤(2)注射碲化镉量子点的小鼠饲养到1、5、15天，麻醉后，取小鼠离体粪便，检测其肠道微生物菌落变化；处死后，取小鼠的肠道样品经多聚甲醛固定后进行HE染色观察其组织病理，以及测定小鼠肠道氧化应激指标、抗氧化应激酶活性和肠道免疫因子指标的变化，判断碲化镉量子点对小鼠的肠道毒性作用。

2.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(1)所述配制碲化镉量子点溶液优选是以超纯水为溶剂，配制成1nmol/mL和10nmol/mL的碲化镉量子点溶液，作为检测碲化镉量子点肠道毒性过程中用于注射小鼠的溶液。

3.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(2)所述用碲化镉量子点溶液注射小鼠为将1nmol/mL和10nmol/mL不同浓度的碲化镉量子点溶液分别注射到两组小鼠体内，每只小鼠注射0.2mL。

4.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(2)所述进行急性暴露试验为优选将小鼠置于具有恒温恒湿循环系统的透明培养箱中，饲养过程中每天投喂饲料，培养箱中的温度为25-26℃，保持光照12h/黑暗12h的光照周期。

5.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(3)所述饲养到1、5、15天为将小鼠置于具有恒温恒湿循环系统的透明培养箱中，饲养过程中每天投喂饲料，培养箱中的温度为25-26℃，保持光照12h/黑暗12h的光照周期。

6.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(3)所述取小鼠离体粪便时所处环境为无菌环境，取得的样品检测前保存在无菌-20℃以下环境中。

7.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(3)所述检测其肠道微生物菌落变化采取的分析方式包括：MiSeq测序、组内多样性分析、组间多样性分析、主成分分析、各类别菌落百分数比较、和组间群落差异分析。

8.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(3)所述取各组小鼠的肠道样品进行病理观察包括解剖小鼠后，取小鼠的小肠和大肠样品，经过切片、染色后，通过显微镜观察肠道样品中的肠道组织损伤。

9.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，步骤(3)所述小鼠肠道氧化应激指标、抗氧化应激酶活性包括脂质过氧化物、丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶。

10.根据权利要求1所述的检测量子点注射后对小鼠肠道及肠道微生物影响的方法，其特征在于，所述肠道免疫指标因子包括白介素6、白介素10、白介素12、肿瘤抑制因子α、转化生长因子β、分泌型免疫球蛋白A。