[发明专利]一种实验小鼠脂肪组织石蜡切片组织处理方法

说明书

本发明涉及一种实验小鼠脂肪组织石蜡切片组织处理方法，属于病理组织制片技术领域，解决传统脂肪组织处理流程用时间长、效率低的技术问题，本发明包括以下步骤：S1、将实验小鼠离体脂肪组织在浓度为10%的中性缓冲福尔马林溶液中固定24h，然后将离体脂肪组织取出留待后步使用；S2、依次采用以下梯度浓度乙醇溶液对离体脂肪组织进行脱水，获得脱水处理后的离体脂肪组织，留待后续包埋。本发明制作实验小鼠脂肪组织石蜡切片用时比传统程序缩短16h，极大地提高了工作效率，而且切片完整，无空洞、皱褶，镜下脂肪组织形态完整、细胞饱满，胞核清晰，细胞膜无断裂，无皱缩，为HE染色、免疫组织化学等后续科研提供了优质的切片基础。

技术领域

本发明属于病理组织制片技术领域，具体涉及的是一种实验小鼠脂肪组织石蜡切片组织处理方法。

背景技术

脂肪组织是机体重要的能量仓库，其广泛存在于全身的皮下及内脏各处。脂肪组织主要由含有脂滴的脂肪细胞组成。近年来，科学家们越来越重视对脂肪组织的研究，如研究脂肪源性肿瘤，肝病等等，这些疾病首先需要我们通过实验动物来研究，而这都离不开形态学方面（如HE染色，免疫组织化学）的观察。因此，制作良好的脂肪组织标本切片至关重要。

但是，由于脂肪组织结构特殊，含有大量的油脂成份，如果组织固定和脱水不完全，就很难制作出形态完整的组织石蜡切片。在常规实验室流程制作石蜡切片时往往出现组织碎裂，有空洞，组织触摸较软、放置后出现凹陷等各种问题，而且如果脂肪组织按照一般组织的展片温度（45℃）来进行展片，温度过高，切片容易变散，无法捞片，从而影响后续的染色、观察及研究。虽然文献报道过许多经验和方法，但是按照文献所述的传统流程制作脂肪组织石蜡切片虽能制作出较完整的脂肪组织石蜡切片，基本满足形态学研究，但整个流程所用时间较长，效率明显降低，减慢了科研的进程。

发明内容

为了解决现有技术中的不足，本发明提供一种实验小鼠脂肪组织石蜡切片组织处理方法。

本发明通过以下技术方案予以实现。

一种实验小鼠脂肪组织石蜡切片组织处理方法，包括以下步骤：

S1、将实验小鼠离体脂肪组织在浓度为10%的中性缓冲福尔马林溶液中固定24h，然后将离体脂肪组织取出留待后步使用；

S2、依次采用以下梯度浓度乙醇溶液对离体脂肪组织进行脱水处理：

a、浓度为70%的乙醇溶液浸泡离体脂肪组织4h；

b、浓度为80%的乙醇溶液浸泡离体脂肪组织3h；

c、浓度为90%的乙醇溶液浸泡离体脂肪组织2h；

d、浓度为95%的乙醇Ⅰ溶液浸泡离体脂肪组织2h；

e、浓度为95%的乙醇Ⅱ溶液浸泡离体脂肪组织2h；

f、浓度为100%的乙醇Ⅰ溶液浸泡离体脂肪组织1h；

g、浓度为100%的乙醇Ⅱ溶液浸泡离体脂肪组织1h；

h、二甲苯Ⅰ溶液浸泡离体脂肪组织30min；

i、二甲苯Ⅱ溶液浸泡离体脂肪组织30min；

j、液态石蜡Ⅰ溶液浸泡离体脂肪组织2h；

k、液态石蜡Ⅱ溶液浸泡离体脂肪组织2h；

获得脱水处理后的离体脂肪组织，留待后续包埋。

进一步地，在所述步骤S2中，将获得脱水预处理后的离体脂肪组织采用石蜡包埋机制备包埋组织块，然后采用半自动旋转式切片机切片，切片厚度为4μm；最后，向展片仪的捞片池中加入蒸馏水，设置展片温度为42℃，将制备的脂肪组织切片平铺于水面上，待切片褶皱展平，用载玻片将切片捞起。