[发明专利]以二氧化钛纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的构建方法在审
| 申请号: | 201910422514.9 | 申请日: | 2019-05-21 | 
| 公开(公告)号: | CN110161099A | 公开(公告)日: | 2019-08-23 | 
| 发明(设计)人: | 刘小强;李乐乐;杨立威;唐云飞;张思;郑贺杰 | 申请(专利权)人: | 河南大学 | 
| 主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327 | 
| 代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新;杨海霞 | 
| 地址: | 475001*** | 国省代码: | 河南;41 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 链霉素 电化学 电极表面 适配体 适配体传感器 核酸外切酶 特异性结合 复合材料 单链DNA 纳米棒 示踪剂 构建 还原法 二氧化钛纳米棒 双金属纳米颗粒 纳米复合材料 氨基交联剂 壳聚糖溶液 表面合成 释放 循环往复 复合物 混合物 电极 检测 沉积 单链 滴加 降解 适体 修饰 灵敏 消化 引入 | ||
1.一种Pt-Sn@TiO2 /GCE电极的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
①TiO2纳米棒的制备:
②Pt-Sn@TiO2纳米复合材料的制备:
将0.19 g K2PtCl6和0.044-0.045 g SnCl2·2H2O溶解在乙二醇中,再调节pH至11-12,然后加入0.4g TiO2纳米棒,混匀,然后在N2氛围下于150-160℃回流3-4小时,在搅拌条件下冷却至室温,洗涤至中性,收集沉淀并干燥即为Pt-Sn@TiO2纳米复合材料,备用;
③Pt-Sn@TiO2 /GCE电极的制备:
将1-2 mg步骤②所得Pt-Sn @ TiO2纳米复合材料均匀分散于1mL 0.2%壳聚糖醋酸溶液中获得悬浮液,然后将悬浮液旋涂在洁净的玻碳电极上,室温下晾干,即为Pt-Sn@TiO2 /GCE电极。
2.如权利要求1所述Pt-Sn@TiO2 /GCE电极的制备方法,其特征在于,步骤①中TiO2纳米棒经下述步骤制备获得:在冰水浴0-5℃条件下,将18-20 mL超纯水、1.7-1.9 mL TiCl4 、1.7-1.9mL氯仿混合均匀,然后于160-180℃反应12-24h,冷却至室温,洗涤至中性,收集产物,干燥即得。
3. 采用权利要求1或2任一所述制备方法制备得到的Pt-Sn@TiO2 /GCE电极。
4.利用权利要求3所述Pt-Sn@TiO2 /GCE电极构建以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将含2-3 mg·mL-1 BS3的PBS缓冲液滴加到Pt-Sn@TiO2 /GCE电极表面,并在室温下孵育1 -2h;
2)将5 μL 1.5-2μM与链霉素适配体互补的氨基化DNA链固定到步骤1)制备所得电极表面,4-10℃孵育10-12h,用PBS缓冲液洗涤,再用5 μL封闭缓冲液室温孵育1-2 h,用PBS缓冲液洗涤以除去多余的封闭缓冲液,最后用5 μL 1.5-2μM链霉素适配体37℃孵育1 h,PBS缓冲液冲洗以除去多余的链霉素适配体,即获得适配体传感器。
5.如权利要求4所述构建以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器的方法,其特征在于,步骤2)中所用封闭缓冲液为:含3%牛血清蛋白的PBS缓冲液。
6.利用权利要求4或5所述方法构建得到的以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器。
7.权利要求6所述以TiO2纳米棒复合材料为电化学示踪剂的电化学适配体传感器在检测链霉素中的应用。
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