[发明专利]一种猪胰脂肪酶的共交联固定化方法

权利要求书

1.一种猪胰脂肪酶共交联固定化方法，其特征在于使用水/油两相反应体系，油相为交联剂丁二醇双丙烯酸酯，水相中的反应物为猪胰脂肪酶及结构如下的分子复合物：

所述的猪胰脂肪酶共交联固定化方法，按以下步骤操作：

1)将数均分子量为454的双酚A环氧树脂、甲醇和二乙烯三胺三种组分按照2∶2∶1的质量比混合，在25～35℃范围内搅拌反应4～5小时，将混合物倒入水中，沉淀物用水反复洗涤除去甲醇和少量的胺，然后放入真空烘箱中常温干燥，得到环氧树脂胺化物；

2)将环氧树脂胺化物与β-环糊精按照1∶2.1～1∶2.3的摩尔比加入到水中，加热搅拌至环氧树脂胺化物全部转化为分子复合物而溶解在水中，保持该水溶液的总质量浓度在5～6wt.％范围；

3)将猪胰脂肪酶溶解在pH＝7.0的磷酸缓冲溶液中，酶的浓度保持在1.0～7.0mg/mL范围；

4)将不同浓度的猪胰脂肪酶溶液与上述分子复合物水溶液按照50mL∶20mL的比例混合；

5)在搅拌下将1.2g丁二醇双丙烯酸酯加入到上述混合水溶液中，反应温度保持在25～30℃范围，10～15分钟后有白色凝胶颗粒形成，停止搅拌使反应体系放置3～4小时，过滤后即得到不同负载量的猪胰脂肪酶固定化产物。