[发明专利]一种基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法

权利要求书

1.一种基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于对法医学硅藻检验中的样品依次进行以下检验：

（1）微波消解，使样品在微波辐射作用下和强酸发生化学反应，以快速溶解有机质；

（2）消解液pH调节，对经微波消解后得到的液体进行pH调节；

（3）消解液中的颗粒动态光学显微成像，调节pH后的消解液以流动方式进入流体光学显微成像装置，其中的颗粒经过检测窗时被高速显微相机快速拍照；

（4）硅藻自动鉴定，利用硅藻自动鉴定系统对所拍摄、存储于计算机的颗粒显微图像进行硅藻自动识别和分类；

（5）数据处理和检验报告制作，对检验数据进行处理和分析，得到样品中硅藻的种类及含量；然后比较各样品所含硅藻的种类及含量，判断匹配程度；最后制作检验报告，为溺死诊断提供依据。

2.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，所述样品包括脏器组织、水样、空白样品和控制样品。

3.根据权利要求2所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，所述空白样品为不含硅藻的样品；所述控制样品为含有中心纲和羽纹纲硅藻的标准样品，其硅藻浓度为1-100个/mL，大小为1-100μm。

4.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，步骤（1）所述微波消解包括如下步骤：将样品加至微波消解罐内，加入强酸后微波消解，消解液用纯水或超纯水稀释；将消解液转移至试管，备用；将消解罐置于NaOH溶液中浸泡，再用超纯水清洗；或加HF溶液或其他可溶解硅藻的酸至消解罐进行微波消解以溶解硅藻细胞壁。

5.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，步骤（1）所述样品包括1－10g脏器组织、1－10mL水样、1－10mL空白样品和1－10mL控制样品。

6.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，步骤（2）所述消解液pH调节步骤具体为：

（1）真空抽滤：采用真空抽滤装置，将步骤（1）得到的消解液抽滤，滤完后加纯水或超纯水继续抽滤，使滤膜表面接近中性；真空抽滤参数为：真空度为100－700mmHg，所采用滤膜直径10－50mm，孔径为0.1－3.0µm；

（2）颗粒脱附：采用超声脱附或真空抽吸的方法处理得到的滤膜，使其表面富集的颗粒脱附至纯水或超纯水中。

7.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，步骤（3）所述消解液中的颗粒动态光学显微成像包括如下步骤：将步骤（2）所得悬浮液加至流体光学显微成像装置的进样器中，悬浮液以0.01mL/min~10mL/min的流速被输送至检测系统，当颗粒物经过检测窗时，其图像即被高速显微相机拍摄，放大倍数为40-2000X。

8.根据权利要求7所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，所述流体光学显微成像装置包括：进样器、流体输送系统、光源、检测窗、高速显微相机、计算机及控制软件。

9.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，步骤（4）所述硅藻自动鉴定的过程包括：采用包括图像识别和分类技术的硅藻自动鉴定软件对所拍摄图像进行实时处理和分析，识别出硅藻并分类，硅藻鉴定结果自动存储于计算机。

10.根据权利要求1所述的基于流体光学显微成像的法医学硅藻检验方法，其特征在于，步骤（5）所述数据处理和检验报告制作包括如下步骤：

（1）统计检验数据；

（2）仅当空白样品检验结果阴性，控制样品检出硅藻种类与已知种类相同、硅藻含量误差小于已知值10-20%时，检材检验结果有意义，方出具检验报告书；

（3）制作检验报告书，按司法鉴定文书相关要求制作检验报告书，在其检验结论部分，表述检材中硅藻的种类及含量，还表述脏器组织和水样硅藻检验结果的匹配程度。